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細胞培養的小技巧細胞培養小技巧:1. 買細胞要去靠譜的地方買，一般上面會有針對細胞的介紹，這樣培養之前可以了解細胞正常生長的狀態圖、傳代、培養基的類型等。2. 不管是買的細胞，還是別人惠贈的細胞，剛拿到手趕緊的做兩件事：檢測是否有支原體污染;迅速擴增凍存，凍存細胞復蘇后第二天更換一次培養基。3. 發現細胞有污染迅速處理掉，特別是當你養了很多種細胞時。細菌污染、真菌污染很容易發現，支原體污染的話，細胞會長的慢，可以買個支原體檢測的試劑盒定期檢測一下。4. 不同細胞生長周期不同。有的生長很快，比如說 MDA-MB-231，傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經足夠了。有的又是特別慢，比如 BT474，傳代是一分二，復蘇起始的時候兩周多才能長滿。這就需要要在培養細胞的過程中多多摸索。5. 對于嬌弱的細胞，就得細心呵護。胰酶消化不能過久，吹得時候要輕柔，離心時候也要注意轉速和時間。每天都要去看一下細胞，肉眼觀察培養基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況。記住，是每天。 

細胞胞健康測定細胞活力和增殖測定可有效評估細胞健康狀況。通常使用臺盼藍或鈣黃綠素-AM等染料或熒光讀數，評估細胞活力和增殖速率。這類測定可用于定量和評估哺乳動物細胞系、原代細胞和干細胞健康狀況。細胞遷移和侵襲測定細胞遷移指細胞為響應特定外部信號（包括化學和機械刺激）而發生的移動。細胞侵襲過程中，細胞可通過細胞外基質（ECM）結構遷移，從而調節環境。細胞遷移和侵襲可借助廣泛使用的膜遷移系統（例如Boyden Chamber測定）體外評估。細胞遷移和侵襲試劑盒常用于癌癥研究，可研究細胞在化學引誘劑梯度下的遷移性和侵襲性。血管生成測定血管生成是現有脈管系統形成血管的過程，受化學信號控制。血管生成測定可研究體外細胞模型中血管生成誘導和抑制情況。藥物發現細胞測定方法開發可加速優化癌癥和其他血管生成依賴性疾病的治療手段。活性氧分子測定活性氧分子（ROS）是具有化學活性的含氧分子。ROS測定可用于篩選化合物，檢測或更深入地理解這類分子對哺乳動物細胞的作用。細胞ROS和氧化應激測定可基于生物分子結合率或活性，提供生物學相關信息，以評估細胞活力、增殖或細胞毒性——這是細胞測定與生化測定的主要區別之一。蛋白測定蛋白測定用于定量蛋白質濃度。常見的蛋白測定方法包括酶聯免疫吸附測定（ELISA，用于診斷和質控應用中的可溶性物質檢測和定量）和MTT測定（用于測量細胞代謝活性，作為細胞活力、增殖和細胞毒性的指標）。活細胞測定活細胞測定可定量一段時間內的細胞行為，了解環境線索的影響。先進的活細胞測定系統可提供洞悉動態存活過程的必要、獨特信息。這種獨特的信息在微流體和其他環境可控的活細胞分析室中獲得，可通過控制氣體、溫度、培養基變化，觀察細胞行為。上述儀器可通過非細胞毒性的光穩定染料和熒光團（細胞示蹤染料和熒光生物傳感器），進一步增強分析能力。在長期的成像研究中，光穩定的培養基可增強熒光示蹤劑的穩定性。

Lgr5蛋白激活樹突狀細胞誘導抗原特異性細胞毒T淋巴細胞治療結腸癌的實驗     摘要：目的探討富含亮氨酸重復序列的G蛋白耦聯受體5(Lgr5)蛋白激活樹突狀細胞(DCs),誘導產生CD8~+細胞毒T淋巴細胞(CTL)進行結腸癌免疫治療的效果。方法利用Lgr5蛋白誘導DCs成熟,同時檢測DCs表面標記物和白細胞介素(IL)-10與IL-12表達量的變化,隨后通過Lgr5-DC誘導Lgr5抗原特異性CD8~+CTL,并檢測Lgr5-DC-CD8~+CTL對正常結腸上皮細胞CCD-18Co和結腸癌細胞HT29的作用,同時檢測干擾素(IFN)-γ釋放量。然后進一步檢測Lgr5-DC-CD8~+CTL對BALB/C-nu/nu小鼠結腸癌的抑制情況,并通過組織染色觀察治療后腫瘤組織的變化。結果與PBS刺激相比,Lgr5蛋白刺激能夠顯著上調DCs表面標記物DC80、DC83、DC86和HLA-DR水平,依次達到3.29、3.06、2.90和6.93倍;同時Lgr5蛋白刺激顯著促進IL-12的釋放和顯著減少IL-10的分泌(P<0.05)。    Lgr5-DC-CD8~+CTL和DC-CD8+CTL均導致少量CCD-18Co細胞殺傷(P>0.05),而Lgr5-DCCD8~+CTL對HT29細胞的殺傷率是DC-CD8~+CTL的4.40倍(P<0.05)。動物實驗表明,BALB/C-nu/nu結腸癌移植鼠經Lgr5-DC-CD8+CTL治療后,腫瘤體積比顯著低于PBS組和DC-CD8~+CTL組,依次達到0.25和0.24倍(P<0.05)。組織染色顯示,Lgr5-DC-CD8~+CTL處理導致明顯的腫瘤組織病理學改變,同時BAX表達升高。結論Lgr5蛋白促進DCs成熟并誘導產生Lgr5抗原特異性CD8~+CTL,Lgr5-DC-CD8~+CTL能夠高效的殺傷腫瘤細胞并延遲腫瘤生長。關鍵詞：富含殼氨酸重復序列的G蛋白耦聯受體;樹突狀細胞;細胞毒T淋巴細胞;結腸癌;免疫治療;小鼠 白細胞介素(IL)-4、 粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF) 、Lgr5 抗原 

科研ELISA是上海篤瑪生物的主營產品，科研ELISA欄目提供該類目產品說明書以及提供產品報價與網上訂購。上海篤瑪生物科技有限公司經過數年的努力發展已迅速成為集產品研發、生產、經營為一體的專業化生物工程公司。公司具有完善的實驗技術開發平臺，成熟的抗原、抗體研發系統，熟練掌握各種酶聯技術，結合公司的研發團隊，可以有效的保證公司產品強的穩定性和高的準確性，同時又具有競爭力的價格。公司目前主要提供生化試劑、分子生物學試劑及試劑盒，各種抗體及免疫學試劑盒、實驗耗材等多門類上萬種產品，產品涉及分子生物學、細胞生物學、免疫學等生命科學的各個領域。以下是我司代理的一些品牌：MP Biomedicals        MP Biomedicals 是一家全球性的跨國公司，總部位于美國加利福尼亞州，并在歐洲、亞洲、澳洲、南美洲設有區域總部。公司生產和銷售超過 55000 種產品，作為全球＊＊的生命科學類產品的供應商，至今已有 50 多年的歷史。我們不斷努力革新，以滿足您對分子生物學、生物化學、細胞生物學等各個學科的研究和應用的需求。MP Biomedicals 擁有巨大的全球性分銷網絡，并在全球多處設有通過 ISO 認證和 FDA 批準的生產和銷售機構。Sigma-AldrichSigma-Aldrich 為德國達姆施塔特默克集團（Merck KGaA）或其子公司商標。默克 Sigma-Aldrich? 產品組合提供廣泛而深入的實驗室和生產材料組合，結合技術支持和科學合作伙伴關系，充分展現了我們共同的科學探索精神NEB            NEB公司成立于二十世紀七十年代中期，擁有眾多經驗豐富的科學家，是生產生命科學試劑的＊＊＊。目前，NEB為基因組研究提供＊齊全的重組酶和天然酶，并且公司業務范圍已延伸至蛋白質組學和藥品開發領域。回顧三十余年來的歷程，NEB公司作為先驅公司之一，為促進生物科技工業的發展做出了巨大的貢獻。NEB美國總部喬 遷新址后擁有＊尖端的設備，有一座現代化的發酵中心及設備齊全的實驗室，這些實驗室主要用于產品生產、質量監控、 產品開發和基礎科研之用。作為首批以商業規模生產限制性內切酶的公司之一，NEB一直專注于內切酶的研究，并保持 業內＊＊水平。            NEB公司一貫堅持以科學為本的原則，公司生產的試劑因其高質量、高性價比享譽世界。NEB（北京）有限公司 New England Biolabs (Beijing) LTD. NEB（北京）有限公司New England Biolabs (Beijing) LTD. 為美國New England Biolabs, Inc.在華投資興建的獨資子公司，負責處理其在中國內地及香港地區的全部業務，同時承擔部分新產品的研發工作。紐英倫生物技術（北京）有限公司成立于2001年11月，為中國生命科學研究者提供＊＊的產品和專業的技術服務，促進國內外生命科學學術交流，與中國科研工作者一起將中國推入到二十一世紀生命科學的前沿中去。Miltenyi Biotec        德國美天旎生物技術有限公司是Miltenyi Biotec在中國的全資子公司，負 責美天旎產品的銷售和相關服務。Miltenyi Biotec以MACS分選技術為廣大生命 科學工作者所熟知。歷經26年，美天旎產品線不斷擴充，已經從細胞磁性分選 金標準的公司成長為擁有從基礎科研到臨床治療完整產品線的多元化公司，可 以為客戶提供樣品制備、細胞分選、流式細胞分析、分子分析、細胞培養和細 胞治療、免疫吸附治療相關的試劑、儀器及配套服務。  Santa Cruz        SANTA CRUZ公司是全球＊大的抗體生產廠商之一，目前公司提供二萬余種研究用的第一抗體，幾乎覆蓋了目前生命科學研究的各個＊新領域，其每種抗體又有多個克隆可以選擇，還提供一些對應蛋白標準品及相關產品，如ABC試劑盒，各種標記二抗，Western試劑盒，蛋白分子量Marker，核抽提物等，為免疫學研究工作提供了極大的方便。

科研ELISA是上海篤瑪生物的主營產品，科研ELISA欄目提供該類目產品說明書以及提供產品報價與網上訂購。上海篤瑪生物科技有限公司經過數年的努力發展已迅速成為集產品研發、生產、經營為一體的專業化生物工程公司。公司具有完善的實驗技術開發平臺，成熟的抗原、抗體研發系統，熟練掌握各種酶聯技術，結合公司的研發團隊，可以有效的保證公司產品強的穩定性和高的準確性，同時又具有競爭力的價格。公司目前主要提供生化試劑、分子生物學試劑及試劑盒，各種抗體及免疫學試劑盒、實驗耗材等多門類上萬種產品，產品涉及分子生物學、細胞生物學、免疫學等生命科學的各個領域。以下是我司代理的一些品牌：STEMCELL TechnologiesSTEMCELL Technologies 成立于 1993 年，是加拿大＊大的生物科技公司，為生命科學研究領域提供專業的細胞培養基和細胞分選產品。 我們的使命是為科學的不斷進步提供高品質、創新的試劑、工具和服務，本著 Scientists Helping Scientists 的精神，用我們的服務幫助您的科學研究。 STEMCELL Technologies 為全球 70 多個國家提供超過 3000 種分子生物學工具，以支持干細胞、免疫學、癌癥、類器官、基因編輯、細胞治療和再生醫學等領域的科學研究。我們的 mTeSR1?、MethoCult? 和 EasySep? 已經成為多能干細胞培養、造血干細胞鑒定以及無柱細胞分選的金標準；許多工具為廣大的科研實驗室所熟知。 此外，我們研發了一系列針對不同類器官的培養基，包括腸道類器官、腦類器官、肝類器官、胰類器官、上呼吸道類器官等，身體力行地推動類器官研究領域的發展。 STEMCELL Technologies，源于科研，歸于科研。與您在科學的道路上攜手前行！*Corning康寧公司是在生命科學實驗室產品方面擁有超過 95 年歷史的全球＊＊的研發、制造和供應商。康寧對于細胞培養及生物制藥、藥物研發及生物光子學、分子生物學及基因組學、微生物學及質量檢測，以及化學領域的效率提高、成本降低、時間節約等方面有著突出貢獻，成為眾多科研人員＊信賴的實驗室伙伴。憑借在材料科學、表面、生物光子學、分子生物學和生物化學方面等多專業領域內的豐富積累，康寧的一系列革命性解決方案，使更多突破性發現成為可能。通過收購及持續的研發投入，我們能夠為更廣泛的生命科學應用提供高品質、創新的實驗室產品及全面解決方案。BD Discovery Labware 業務收購完成后，康寧將其旗下 Falcon?、BioCoat?、Matrigel? 和 Gentest? 等品牌納入康寧品牌大家族 ：Corning?、Axygen?、Gosselin? 和 PYREX?。我們可信賴的卓越品牌協同專業技術，幫助研究者全 面優化項目方案和實驗流程。康寧的技術發展將改變研究者的工作方式，諸如用于免標記檢測的 Corning? Epic? ＊＊技術及服務、一系列用于細胞培養和檢測的優化合成表面、生物表面、用于更有效大規模細胞擴增及下游應用的單品及封閉系統解決方案、自動化方案、用于簡化樣品制備及基因庫建設的二代測序方案，這些 方案將為科學家開啟全新的高效時代，成就突破性的發現。Abcam        Abcam公司成立于1998年，位于英國的劍橋科學園，是世界上＊有名的抗體供應商之一。Abcam以優質、齊全的產品、完善的網絡支持功能和強大的技術支持隊伍得到全球客戶的認可和贊譽。并在2004年獲得了對于生物界公司＊＊＊＊的英女王獎，擁有很好的知名度和口碑。QIAGEN        QIAGEN是全球＊＊的樣本和分析技術的供應者，提供各種樣本純化和分析的方法和產品。先進的、高質量的產品和服務確保了從樣本獲得分析結果。BioLegend        Biolegend公司自2002年成立以來，一直致力于為生物醫藥研究領域提供＊＊的，高質量的流式抗體、試劑盒及其它相關產品。公司聚集了一批來自PharMingen的專業杰出人士，建立了一支雄厚技術背景的專業隊伍，并通過其自身的先天優勢，以及與世界知名實驗室和研究所的良好合作關系，以＊合理的價格為廣大客戶提供卓越的免疫學和細胞生物學產品，并不斷地開發新產品，以滿足飛速發展的生命科學研究的需要。短短幾年時間，Biolegend公司得到了飛速發展，已躋身全球＊先進的抗體公司行列，并在2009年成為美國哈佛大家的＊＊抗體供應商！            Biolegend公司的試劑主要包括細胞免疫、細胞因子、趨化因子、粘附分子等及與癌癥研究、T 調節細胞研究、干細胞研究、先天免疫研究、細胞周期分析、凋亡研究及特定修飾類抗體等領域相關的試劑，用于流式、ELISA、免疫沉淀、WB、免疫熒光、免疫組化、及體內體外功能學試驗。其中，Biolegend公司的流式抗體以其具有較寬范圍的熒光選擇及較高的性價比，為廣大科研工作者所接受！同時，公司配備了一支經驗豐富的技術服務隊伍，為客戶提供＊＊的配色方案及快速的售后處理服務！流式細胞術簡介：流式細胞術就是利用流式細胞儀對處在快速直線流動狀態中的單列細胞或生物顆粒進行逐個、多參數、快速的定性、定量分析或分選的技術，具有檢測速度快、測量指標多、采集數據量大、分析全面、方法靈活等特點。流式細胞術已被眾多的研究人員作為優先選擇的研究技術。目前，流式細胞術已廣泛應用于免疫學、細胞生物學、遺傳學、生物化學、腫瘤學、血液學等基礎學研究和臨床醫學領域。