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　　ELISA是酶聯接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技能之后開展起來的一種免疫酶技能。此項技能自70年代初面世以來，開展十分迅速，現在已被廣泛用于生物學和醫學科學的許多領域。 　　ELISA是以免疫學反應為基礎，將抗原、牽9體的特異性反應與酶對底物的**催化作用相結合起來的一種敏感性很高的實驗技能。因為抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每參加一種試劑孵育后，可經過洗刷除掉剩余的游離反應物，從而確保實驗結果的特異性與穩定性。在實踐使用中，經過不同的設計，詳細的辦法過程可有多種。即:用于檢測抗體的間接法(圖a)、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。 　　那么一套完好的ELISA試劑盒應該有哪些呢？ 　　答：（1）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）； 　　（2）酶標記的抗原或抗體（結合物）； 　　（3）酶的底物； 　　（4）陰性對照品和陽性對照品（定性測定中），參考規范品和操控血清（定量測定中）； 　　（5）結合物及標本的稀釋液； 　　（6）洗刷液； 　　（7）酶反應停止液。

DAB染色液用于免疫組化染色，應用在Dako 自動染色系統上。 DAB染色液的使用方法 1.DAB顯色液配制 10mM Tris-HCl (pH7.6) 9mL +DAB (diaminobezidin 3，3-二氨基聯苯胺) +0.3%(W/V) NiCl2 或CoCl2 1mL ,顯色時加入5-10mL 30%H2O2 混勻后立即使用 2. 顯色 準備好含有待測蛋白的固相膜：包括電泳、轉印、封阻、一抗（或生物素）處理、辣根過氧化酶（HRP）標記的二抗（或鏈霉親和素）處理、清洗等步驟。 3.加入適量的DAB顯色液，鋪滿整個固相膜表面（可按比例增減）。 4. 置于平式搖蕩儀上，在室溫下孵育2至5分 鐘，避免光照（暗室操作），直至棕褐色沉淀出現。 5.用鑷子夾起固相膜，放進無離子水里清洗。 6.空氣中晾干。 7. 拍照記錄 。 DAB染色液的注意事項 1． DAB溶液應低溫密封保存。如有結晶析出，應確保結晶完全溶解再行使用； 2． 顯色工作液應現用現配，新鮮配制的工作液應為無色或淺棕色，如顏色過深，請勿使用； 3． DAB在常溫下不穩定，每次取用后均應及時加蓋密封放回冰箱，以免因DAB分解影響實驗，或因滲漏造成實驗環境污染； 4． DAB有潛在致突變作用，操作時應注意穿戴好防護用具。

不同來源胎牛血清的差別市場上的胎牛血清種類繁多，魚龍混雜，很多科研工作者，特別是剛接觸細胞培養的人，難以分辨血清質量的優劣。本人根據十多年來血清生產銷售的經驗，總結如下： 一、外觀 拿到血清，**接觸的是血清外觀，對于缺少細胞培養經驗的人來說，外觀的判斷尤為重要 1、顏色 根據血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現出黃色或紅色，我國的細胞培養用血清標準是不高于20mg/dl，實際上，血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響，這個指標的意義在于能體現出采血過程的嚴謹規范程度，良好的操作能降低血清的溶血。 國產血清的采血點很分散，大多是由屠戶采血后馬上離心收集，所以很少會有溶血，表現出明亮的蠟黃色，當然，國產血清也很少有標準意義上的胎牛血清。 進口胎牛血清或多或少總有點溶血，因為真正的胎牛血清凝血功能差，紅細胞容易破裂。 總的來說，國產的血清呈現出蠟黃。進口的血清，****的呈現出談黃、微紅色，如Gibco 16000，差點的呈現出橘紅色或鮮紅色。當然，熱滅活血清或保存不當的血清，由于血紅蛋白的破壞氧化，會呈現出暗紅，甚至咖啡色。 2、沉淀 很多血清客戶，會發現進口血清有沉淀，從而懷疑血清的質量問題，這是沒有根據的。 血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產生，對血清質量沒有任何影響，沉淀的產生原因很多，和廠家的加工生產方式密切相關。 國產的血清，大多來自北方，由于價格低廉，保存環境都不好，從采血、冷凍、運輸到生產會經過多次凍融，每次凍融過程，就會析出部分纖維蛋白沉淀，這樣，血清成品過濾后看起來反而更加的“干凈”，很少有沉淀產生。 進口的胎牛血清，過濾分裝前很少會反復凍融，生產后的成品也是清澈的，但隨著時間的推移，血清中的大量纖維蛋白會析出形成沉淀。當然，進口的新生牛血清，一般牛齡都在2周左右，血清中的各種蛋白含量明顯偏高，生產后血清可能會渾濁，甚至有大量沉淀。 當然，購買回來的血清都是冰凍狀態，使用時需要融化，融化過程**在溫度較低的狀態下慢慢進行，否則沉淀相對較多，雖然沉淀并不直接影響血清的質量，但對細胞的顯微觀察有一定的阻礙。 3、澄清度 進口胎牛血清由于蛋白和脂類等物質含量低，表現為稀薄、清淡，而國產血清，因為絕大多數是新生牛血清，相對而言更加粘稠，顏色略深，這對于初步接觸血清的人很難判斷，但把兩者進行對比，可容易分辨。 二、主要技術指標 目前國內血清的質量標準是2005版的《*******藥典》，主要指標有以下幾點： 1、內毒素 標準為不高于5EU/ml。內毒素是細菌破碎后細胞壁的成分，因此內毒素含量的高低可表現出采血到生產一系列過程中的無菌操作情況。目前，國產血清基本都能達到這一要求，很多進口胎牛血清內毒素含量反而更高，如Gibco 26140，只要求不高于50EU/ml，高出我國標準10倍，即使是16000，也要10EU/ml，血清質量也未見影響。可見，內毒素含量偏高不影響質量，除非含量極高，預示著已經污染。 2、總蛋白含量 胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml，數值偏高，說明采血的牛齡偏大，不是胎牛，數值偏低，表明血清可能摻水了。 3、血紅蛋白 標準為不高于20mg/dl，顏色越紅，數值越高，反之，數值越低。 4、pH 國產血清，大多高于7.5，進口胎牛血清，大多低于7.5，具體原因未知，可能和牛齡有關，這也能用來初步鑒別血清的來源。 5、微生物 包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原性病毒等。隨著國內血清廠家生產條件的改善提高，細菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制，支原體經過0.1um過濾，大多也能清除。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴重的，主要是生產環境過程中帶入，又無法過濾，很難徹底清除，但對血清質量影響不大。病原性病毒，特別是BVDV，在國產血清中幾乎90%以上都存在，這類微生物是影響國產血清質量的重要因素之一，而進口胎牛血清中基本都控制的很好。 6、免疫球蛋白 國產血清的只是定性檢測，結果也很不準確，進口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數值能完全體現出采血的時的牛齡情況，國產血清，基本都是新生牛的，血清中容易產生IgM，IgG的含量也偏高，進口胎牛血清，不含IgM，IgG的含量也較低。 7、其它 不管是國產還是進口血清，都是不測抗生素的（無四環素胎牛血清除外）。國外，抗生素的使用很嚴格，用量也很少，每頭奶牛的產品包括血清都可以溯源的，因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量極低；國內，抗生素的濫用已成了普遍現象，血清中殘留很高，對細胞培養極為不利，這是國產血清質量差的根本原因。 三、血源 市場上的血清血源主要分為中國、北美、南美和澳洲。 1、國產血清質量差，這是公認的，主要原因并不是生產廠家的責任，而是天然環境差和抗生素的大量使用。國內環境污染嚴重，同時飼養過程中抗生素極其濫用，有毒有害物質會大量殘留在血清中，*終不利于細胞的生長。 2、南美血清，來源很多，如Bioind的巴拿馬、Gibco的烏拉圭、巴西等，這些血清由于采血的不可控性，質量參差不齊，當然，相對于國內血清來說好的多。另外，國內銷售的南美血清大多顏色鮮紅，如Bioind、Gibco、Hylone等品牌，但阿根廷的血清例外，這可能和各國的采血、生產工藝有關。 3、北美血清，主要來自美國和加拿大，如Hclone的SH30396、SH30070、SH30071、Gibco的16000-044、26140-079等。這類血清，等級越高的顏色越淡，表現為淡黃中帶一點微紅，SH30070和SH30396對比就很明顯，特級胎牛血清基本就能進行干細胞培養。北美血清還有一個顯著特點就是每瓶血清都能溯源，這對一些大型的疫苗廠、藥廠尤為重要。 4、澳洲血清，來源主要是新西蘭和澳大利亞，這是在北美血清禁運之后進入中國市場的，一般不具有溯源功能，由于生產、運輸等原因，價格相對來說比較貴。拿Gibco的10099和16000相比較，后者質量等級更高，顏色更淡，性價比更高。

 1. 如何選用特殊細胞系培養基？ 培養某一類型細胞沒有固定的培養條件。在MEM中培養的細胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長。總之，**MEM做粘附細胞培養、RPMI-1640做懸浮細胞培養是一個好的開始。2. 何時須更換培養基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數據上的更換時間，按時更換培養基即可。 3. 可否使用與原先培養條件不同的培養基？  不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應的細胞培養基，若驟然使用和原先提供的培養條件不同的培養基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活。 4. 可否使用與原先培養條件不同的血清種類？不能。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源，所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清，，在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 5. 何謂FBS, FCS, CS, HS ?FBS (fetal bovine serum) 和FCS (fetal calf serum) 是相同的意思，兩者都是指胎牛血清，乃錯誤的使用字眼，請不要再使用。CS (calf serum) 則是指小牛血清。HS (horseserum) 則是指馬血清。 6. 培養細胞時應使用5% 或10% CO2？或根本沒有影響？一般培養基中大都使用HCO3-/CO3 2-/H+ 作為pH 的緩沖系統，而培養基中NaHCO3 的含量將決定細胞培養時應使用的CO2 濃度。當培養基中NaHCO3 含量為每公升3.7 g 時，細胞培養時應使用10% CO2；當培養基中NaHCO3 為每公升1.5 g 時，則應使用5% CO2 培養細胞。 7.Hank's 平衡鹽溶液(HBS)要在空氣中使用，不需要CO2培養箱。原因是什么？Hank's 平衡鹽溶液(HBS)和Earle's平衡鹽溶液(EBS)有什么本質的功能差別？HBS和EBS 的主要差別在于碳酸氫鈉的水平，在Eagles (2.2 g/L)中比在Hanks (0.35 g/L) 中高。碳酸氫鈉需用高水平的CO2平衡，以維持溶液的PH值。Eagles液在空氣水平的CO2 中，溶液會變堿，Hanks液在CO2培養箱中會變酸。如果希望在CO2培養箱中保存組織，需要用Eagles液，如果僅僅是清洗將要在細胞培養基中儲存的組織，用Hanks液就可以了。 8. 什么是細胞的接種密度？依照細胞株基本數據上的接種密度或稀釋分盤的比例接種即可。細胞數太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因。 9. 懸浮性細胞應如何繼代處理？一般僅需持續加入新鮮培養基于原培養角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養液太多時，可將培養角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞的培養液至另一新的培養角瓶，加入新鮮培養基稀釋至適當濃度，重復前述步驟即可。 10. 冷凍管應如何解凍？ 取出冷凍管后，須立即放入37℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化，并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管之爆裂。 11. 細胞冷凍管解凍培養時， 是否應馬上去除DMSO？除少數特別注明對DMSO 敏感的細胞外，絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞)，在解凍之后，應直接放入含有10-15 ml新鮮培養基的培養角瓶中，待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO 即可，如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附的問題。 12. 附著性細胞繼代時所使用的trypsin-EDTA 濃度？應如何處理？一般使用的trypsin-EDTA 濃度為0.05% trypsin-0.53 mM EDTA Na4。 第一次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中，保存于-20 ℃，避免反復冷凍解凍造成trypsin 的活性降低，并可減少污染的機會。 13. 欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應為多少轉速？回收動物細胞，其離心速率一般為300xg (約1 000 rpm)，5-10 分鐘，過高的轉速，將造成細胞死亡。 14. 細胞冷凍培養基的成份為何？動物細胞冷凍保存時*常使用的冷凍培養基是含5-10% DMSO (dimethyl sulfoxide) 和90-95% 原來細胞生長用的新鮮培養基均勻混合之。注意：由于DMSO 稀釋時會放出大量熱能，故不可將DMSO 直接加入細胞液中，必須使用前先行配制完成。 15. DMSO 的等級和無菌過濾的方式為何？冷凍保存使用的DMSO 等級，必須為Tissue culture grade之DMSO (如Sigma D2650)，其本身即為無菌狀況，第一次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中，保存于4℃，避免反復冷凍解凍造成DMSO 的裂解而釋出有害物質，并可減少污染的機會。若要過濾DMSO，則須使用耐DMSO 的Nylon 材質濾膜。 16. 冷凍保存細胞的方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20℃ 30 分鐘*) → -80℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序的可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃至-80℃以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20℃不可超過1 小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟，接放入-80℃冰箱中，惟存活率稍微 降低一些。 17. 細胞欲冷凍保存時， 細胞冷凍管內應有多少細胞濃度？冷凍管內細胞數目一般為1x106 cells/ml vial，融合瘤細胞則以5x106 cells/ml vial 為宜。  18.培養基中是否須添加抗生素？ 除于特殊篩選系統中外，一般正常培養狀態下，培養基中不應添加任何抗生素。 19. 應如何避免細胞污染？細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉漿菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室環境不佳、污染的血清和污染的細胞等。嚴格的無菌操作技術、清潔的環境、與品質良好的細胞來源和培養基配制是減低污染的**方法。當然，適當添加抗生素也是防止細胞污染的途徑，Invivogen公司就能提供多種細胞抗生素類產品： Primocin?——原代細胞抗生素 Primocin?是專門設計用于保護原代細胞免受微生物污染的抗生素，對革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、支原體和真菌均有殺傷作用。Primocin?對原代細胞沒有毒性，因為其作用的靶標只存在于微生物上。其中細菌的靶標為DNA解旋酶和原核細胞核糖體亞基30S和50S；真菌的靶標為麥角固醇（一種只發現于真菌和酵母細胞膜的分子）。Primocin?的推薦使用濃度為100 mg/ml,無需添加青霉素/鏈霉素。 產品名稱 規格 產品編號 Primocin? 500 mg (10 x 1 ml) ant-pm-1 1 g (1 x 20 ml) ant-pm-2Normocin?——細菌、真菌、支原體多效抗生素Normocin?具有抗細菌、真菌、支原體三種微生物的作用，其包含兩種成分可通過阻斷DNA復制和蛋白合成來殺滅細菌和支原體。第三種成分通過干擾細胞膜離子交換來清除酵母和真菌。Normocin?推薦使用濃度為100 mg/ml，該濃度對細胞沒有毒性。此外，如果與青霉素/鏈霉素合用，可以增加抗菌譜。 產品名稱 規格 產品編號  Normocin? 500 mg (10 x 1 ml) ant-nr-1 1 g (1 x 20 ml) ant-nr-2Fungin?——真菌特異性抗生素Fungin?是Pimaricin（匹馬菌素）的可溶性形式，Pimaricin是十九世紀五十年代發現的多烯抗真菌試劑，可通過干擾細胞膜離子交換的方式殺滅酵母、霉菌和真菌。Fungin?十分穩定，在37°C放置6天仍具有活性。與Amphotericin B（兩性霉素B）需要溶于有毒的脫氧膽酸鹽不同，Fungin?是水溶性的，對細胞無毒性，并且不會影響細胞代謝，推薦使用濃度為10 mg/ml - 50 mg/ml。  產品名稱 規格 產品編號 Fungin?  75 mg (5 x 1.5 ml) ant-fn-1 200 mg (1 x 20 ml) ant-fn-220. 如果細胞發生微生物污染時，應如何處理？原則上：直接滅菌后丟棄之。當重要的培養污染時，研究者可能試圖消除或控制污染。首先，確定污染物是細菌、真菌、支原體或酵母，把污染細胞與其它細胞系隔離開，用實驗室消毒劑消毒培養器皿和超凈臺，檢查HEPA過濾器。高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對一些細胞系有毒性，因而，做劑量反應實驗確定抗生素和抗霉菌素產生毒性的劑量水平。這點在使用抗生素如兩性霉素B和抗霉菌素如泰樂菌素時尤其重要。下面是推薦的確定毒性水平和消除培養污染的實驗步驟。(1)  在無抗生素的培養基中消化、計數和稀釋細胞，稀釋到常規細胞傳代的濃度。(2)  分散細胞懸液到多孔培養板中，或幾個小培養瓶中。在一個濃度梯度范圍內，把選擇抗生素加入到每一個孔中。例如，兩性霉素B推薦下列濃度，0.25，0.50，1.0，2.0，4.0，8.0 mg/ml。(3)  每天觀測細胞毒性指標，如脫落，出現空泡，匯合度下降和變圓。(4)  確定抗生素毒性水平后，使用低于毒性濃度2～3倍濃度的抗生素的培養液培養細胞2～3代。(5)  在無抗生素的培養基中培養細胞一代。(6)  重復步驟4。(7)  在無抗生素的培養基中培養4～6代，確定污染是否以已被消除。 21. 支原體(mycoplasma) 污染的細胞， 是否能以肉眼觀察出異狀？不能。除極有經驗之專家外，大多數遭受支原體污染的細胞株，無法以其外觀分辨之。 22. 支原體污染會對細胞培養有何影響？支原體污染幾乎可影響所有細胞的生長參數，代謝及研究的任一數據。故進行實驗前，必須確認細胞為mycoplasma-free，實驗結果的數據方有意義。 23. 偵測出細胞株有支原體污染時， 該如何處理？直接滅菌后丟棄，以避免污染其它細胞株，但是如果您的樣本珍貴，建議您使用支原體去除試劑去除污染 Plasmocin?——支原體預防與去除利器Plasmocin?是目前全球*受科研工作者歡迎的支原體抗生素之一。其包含大環內酯物及對苯二酚兩種主要成分，可有效作用于支原體復制的蛋白合成階段和DNA復制階段，只需兩周即可清除支原體污染，并且不會影響細胞本身代謝；其特有的轉運載體可以將有效成分轉運到細胞內，故對胞內支原體和胞外游離的支原體都十分有效。此外，低濃度的Plasmocin?對多種革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌也有一定的清除作用。 Plasmocin? Treatment (ant-mpt)用于清除支原體污染，使用濃度為25 ug/ml,2周即可徹底清除支原體。Plasmocin? Prophylactic (ant-mpp)用于預防支原體污染，定期添加于細胞培養基中，使用濃度為2.5 - 5 ug/ml。 產品名稱 規格 產品編號 Plasmocin? treatment 50 mg (2 x 1 ml) ant-mpt Plasmocin? prophylactic 25 mg (10 x 1 ml) ant-mppPlasmocure?——強力清除具有Plasmocin?抗性的支原體據報道在極少數情況下，有些支原體對Plasmocin? 具有抗性。基于此，InvivoGen又開發了第二款支原體抗生素Plasmocure?。Plasmocure?采用不同于Plasmocin?作用機制的兩種抗生素來殺滅支原體，處理兩周時間即可徹底清除這些頑固支原體。在處理過程中有輕度的細胞毒性，但支原體清除后細胞系可完全恢復。Plasmocure?推薦使用濃度為50 mg/ml。 產品名稱 規格 產品編號 Plasmocure? 100 mg (1 x 1 ml) ant-pc24. CO2 培養箱的水盤如何保持清潔？定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之。 25. 為何培養基保存于4℃ 冰箱中， 顏色會偏暗紅色，且pH值會越來越偏堿性？培養基保存于4℃冰箱中，培養基內的CO2會逐漸溢出，造成培養基越來越偏堿性。而培養基中的酸堿指示劑(通常為phenol red) 的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養基偏堿的結果，將造成細胞生長停滯或死亡。若培養基偏堿時，可以通入無菌過濾的CO2， 以調整pH 值。 26. 各種細胞培養用的dish，flask是否均相同？不同廠牌的dish 或flask，其所coating 的polymer 不同，制造程序亦不同，雖對大部分細胞沒有太大之影響，惟少數細胞則可能因使用廠牌不同的dish 或flask 而有顯著的生長差異。 27. 購買的細胞冷凍管經解凍后，為何會發生細胞數目太少的情形？研究人員在冷凍細胞的培養時出現細胞數目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養基即可。 28. 購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養時出現存活率不佳，常見原因可歸納為：培養基使用錯誤或培養基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養溫度使用錯誤。細胞置于-80℃太久。 29. 如何避免沉淀物的產生?我們建議您在使用血清的時候，注意下列的操作:(1)  解凍血清時，請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)，若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃)，非常容易產生沉淀物。(2)  解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發生。(3)  請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩定的成分也會因此受到損害，而影響血清的質量。(4)  血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。(5)  若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。 30.  L-谷氨酰胺在細胞培養中重要嗎？它在溶液中不穩定嗎？L-谷氨酰胺在細胞培養時是重要的。脫掉氨基后，L-谷氨酰胺可作為培養細胞的能量來源、參與蛋白質的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中經過一段時間后會降解，但是確切的降解率一直沒有*終定論。L-谷氨酰胺的降解導致氨的形成，而氨對于一些細胞具有毒性。 31.  GlutaMAX-I是什么？培養細胞如何利用GlutaMAX-I？這個二肽有多穩定？GlutaMAX-I 二肽是一個L-谷氨酰胺的衍生物，其不穩定的alpha-氨基用L-丙氨酸來保護。一種肽酶逐漸裂解二肽，釋放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I二肽非常穩定，即使在121℃滅菌20分鐘，GlutaMAX-I 二肽溶液有*小的降解，如果在相同條件下，L-谷氨酰胺幾乎完全降解。 32. 什么培養基中可以省去加酚紅？酚紅在培養基中用作PH值的指示劑：中性時為紅色，酸性時為黃色，堿性時為紫色。研究表明，酚紅可以模擬固醇類激素的作用，（特別是雌激素）。為避免固醇類反應，培養細胞，尤其是哺乳類細胞時，不用加。

1.Innova Latex Conjugation Kit有什么獨特之處？乳膠顆粒經過特殊處理，性能更優，標記更簡便，手頭操作時間僅需3分鐘。乳膠納米粒子容易聚合，需要用超聲或渦流等方法再懸浮。Innova經過特殊處理的乳膠顆粒，極大地減小了乳膠的聚合，無需再懸浮，乳膠粒子回收率高。2.乳膠通過什么方式結合？抗體和經過特殊處理的乳膠通過賴氨酸殘基共價結合。3.標記抗體是否會結合在乳膠顆粒表面？乳膠顆粒表面經過特殊處理，防止乳膠表面與抗體相互作用。4.每個試劑盒中有多少個乳膠顆粒？每支凍干的乳膠包含40ul 1%乳膠，4個反應的試劑盒中共有160ul 1%的乳膠，10個反應的試劑盒中就有400ul 1%的乳膠。40ul 1%乳膠可以用于大約50次側向層析檢測。5.該試劑盒可以用來標記哪些類型的抗體？來源于小鼠，山羊等種屬的單克隆抗體或多克隆抗體都可以使用。6.該試劑盒是否可以用于標記小分子？該乳膠標記試劑盒可用于抗體，也可用于帶有伯胺官能團的小分子物質。7.如果抗體保存在不兼容的緩沖液中怎么辦？多數常用的緩沖液和添加物會對標記反應產生影響，用于標記的抗體應該處于PH6~7的10 – 50 mM MES, MOPS或HEPES溶液中，然而這些緩沖液不是常用的抗體保存溶液，Innova的Antibody Concentration and Clean-Up Kit for LATEX 可以將抗體溶液轉換為適合標記反應的緩沖液。8.如果抗體中含有其他蛋白成分或純度低怎么辦？標記反應前去除抗體中的其他蛋白質，或者使用AbPure系列純化產品來純化腹水，血清或組織培養上清。9.如何選擇乳膠顆粒的顏色？藍色，紅色和黑色乳膠的特性相同，您可以根據自己的實驗需求選擇想要的顏色。