科研基礎小知識分享,細胞傳代
一、什么是細胞傳代?細胞傳代是細胞培養過程中的一項基本技術,是指將培養的細胞在一定的條件下進行分離、再培養的過程。傳代過程中,細胞會逐漸生長,并填滿整個培養容器,因此需要進行分離、再培養。細胞傳代是實驗室中細胞培養的基本操作之一,也是細胞生物學實驗中必不可少的步驟之一。二、細胞傳代的基本步驟1. 細胞分離:將原代細胞或傳代細胞從培養容器壁上分離下來。常用的分離方法有機械分離法和酶解法。機械分離法是通過輕輕敲打或刮取細胞的方法,使細胞從培養容器壁上脫落。酶解法是通過加入特定的酶,使細胞間的連接變得脆弱,容易分離。2. 細胞洗滌:將分離下來的細胞進行洗滌,去除殘留的酶和培養基中的雜質。3. 細胞計數:對洗滌后的細胞進行計數,以確定傳代所需的細胞數量。4. 細胞分散:將洗滌后的細胞進行分散,使細胞均勻分布在培養基中。常用的分散方法有機械分散法和酶解法。5. 細胞接種:將分散后的細胞接種到新的培養容器中,并添加適量的培養基。6. 培養:將接種好的培養容器放入恒溫培養箱中,進行細胞培養。三、傳代細胞的類型根據細胞的來源和特點,可以將傳代細胞分為原代細胞和連續細胞系兩類。原代細胞是從機體取出后直接培養的細胞,一般只能培養有限代次(10-20代),之后就會衰老死亡。連續細胞系是從原代細胞變異而來,具有無限增殖的能力,如腫瘤細胞、雜交瘤細胞等。常見的連續細胞系有 HeLa 細胞系、A549 細胞系、BEAS-2B 細胞系等。四、注意事項1. 操作前準備:操作前需要準備好所需物品,如培養皿、吸管、離心管、顯微鏡等,并進行滅菌處理。同時,操作人員需要洗手并穿戴好防護服和口罩等個人防護用品。2. 操作過程:操作過程中需要注意無菌操作,避免污染。同時,需要掌握好細胞分離、洗滌、計數、分散和接種等步驟的技術要點,保證細胞的存活率和純度。3. 培養條件:細胞傳代需要在恒溫、恒濕、無菌的環境中進行,以保證細胞的正常生長和繁殖。同時,需要定期檢查細胞的生長狀態和形態特征,以及培養基的 pH 值和營養成份等指標是否正常。4. 廢棄物處理:廢棄的培養基和細胞需要經過滅菌處理后才能丟棄,以避免對環境和人員造成危害。總之,細胞傳代是實驗室中一項重要的技術操作,需要掌握好相關的基礎知識和技術要點,以保證細胞的正常生長和繁殖。同時,需要嚴格遵守操作規程和注意事項,避免污染和安全事故的發生。