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檢測elisa試劑盒的五大方法

2018-06-23

  elisa試劑盒是有著極端嚴厲的要求,不能呈現過失。所以人們對elisa試劑盒的檢測必定要注意,沒有人希望呈現問題。那elisa試劑盒檢測有哪些方法?

  一、直接法

  將抗原直接固定在固相載體上,參與酶符號的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。

  1. 優勢:操作手續簡略,因無須運用二抗可防止交互反應。

  2. 缺點:試驗中的一抗都得用酶符號,但不是每種抗體都適合做符號,費用相對前進。

  二、間接法

  此測定方法與直接法類似,不相同在于一級抗體沒有酶符號,改用酶符號的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。

  1. 優勢:二抗可以加強信號,而且有多種挑選能做不相同的測定剖析。不加酶符號的一級抗體則能保存它zui多的免疫反應性。

  2. 缺點:交互反應發生的機率較高。

  三、雙抗體夾心法

  被檢測的抗原包被在兩個抗體之間,其間一個抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體。另一個則是檢測抗體,此抗體可用酶符號后直接測定抗原的量;或不符號,再透過酶符的二級抗體來測定抗原的量。這兩種抗體有必要留神挑選,才可防止交互反應或競賽相同的抗原聯絡部位。

  1. 優勢:高活絡、高專一性,抗原無須事前純化。

  2. 缺點:抗原必定得具有兩個以上的抗體聯絡部位。

  四、競賽法

  樣本里的抗原(安閑抗原)和純化并固定在固相載體上的抗原(固定抗原)一起競賽相同的抗體,當樣品里的安閑抗原越多,就可以聯絡越多的抗體,而固定抗原就只能聯絡到較少的抗體,反之亦然。經清潔進程,洗去安閑抗原和抗體的復合物,只留下固定抗原和抗體的復合物,拿來與只需固定抗原的對照組效果相比較,依據呈色差異就可計算出樣品里的抗原含量。

  1. 優勢:可適用比較不純的樣本,而且數據再現性很高。

  2. 缺點:整體的敏感性和專一性都較差。

  五、依據細胞法

  是一種新的定性蛋白檢測技能,將細胞直接在微孔板里培育,待檢測時,不需抽提蛋白和裂解細胞,便可直接測量微孔板里蛋白經影響或抑制作用后的改動。

  1. 優勢:無需裂解細胞,所以政策蛋白丟掉少,可測定無缺細胞、黏附細胞、還有非粘附細胞。

  2. 缺點:不能測定抗原量。


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