Elisa檢測實驗有許多關鍵技術點,在前面的資訊內容中也為咱們介紹過不少。近段時間,不少的客戶通過留言或來電都咨詢過ELISA試劑盒加樣的技巧,今日,我公司就為我們具體介紹:
1.細胞上清:
前處理有必要是細胞離心去除,每孔直接加100μl即可。假設濃度太高需稀釋時,用標準品稀釋液直接稀釋。
2.腦脊液:
前處理有必要是細胞離心去除,每孔直接加100μl即可。假設濃度太高需稀釋時,用標準品稀釋液直接稀釋。
3.組織勻漿液的樣本
要制備過程中需要在緩沖液中參與蛋白酶克制劑,避免蛋白成份被內源性蛋白酶降解,構成檢測效果的值偏低。因組織勻漿液的樣本蛋白品種多,含量豐盛,實驗參照血清血漿標本的處理辦法進行,否則就會影響實驗效果。具體是參與50
ul樣本分析緩沖液后加50 ul標本,需稀釋時,請將樣本與樣本分析緩沖液等量參與,缺少部分用標準品稀釋液補償至100ul。
4.血清血漿:
請參與50ul樣本分析緩沖液后加50ul標本,如稀釋量大,請將樣本與樣本分析緩沖液等量參與,缺少部分用標準品稀釋液補償至100ul。
A 血清標本應是天然凝聚后,取上清,避免在冰箱中凝聚血液;
B 血漿標本,舉薦用EDTA的辦法收集若待測樣本不能及時檢測,標本收集后請分裝,凍存于-20℃,避免重復凍融。
C 血清標本不應增加任何防腐劑或抗凝劑;
D 標本應清澈透明,檢測前樣本中如有懸浮物應通過離心去除。
E 請勿運用溶血,高血脂或污染的標本檢測,否則效果將不精確。
因為政策蛋白不同,可能構成降解的蛋白類型可能不一樣,假設實驗前通過文獻判定用哪種蛋白酶克制劑,有針對性參與,可節省克制劑。假設查不到相關文獻,可采用組合克制的辦法確保蛋白不易被降解。