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elisa試劑盒的工作原理

2018-07-07

  ELISA試劑盒在國內有許多種叫法:例如:ELISA檢測驗劑盒、ELISA Kit、酶聯免疫試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒、酶聯免疫剖析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測驗劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒等 ELISA試劑盒自從60-70時代面世以來,得到全世界科研工作者的認可及推崇,在歐美及我國取得很大的推行,尤其是國內生化范疇的長足開展。 Elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的試驗確診辦法。因為其試劑安穩、易保存,操作簡便,成果判別較客觀等要素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各范疇中。ELISA檢測驗劑盒是用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。

  免疫測定技能的根底在于抗原抗體之間的特異結合反響,所以任何優質的確診試劑離不開優質的質料,如抗原抗體,酶等。以前用于免疫測定的抗原一般為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動物后取得的多克隆抗體和運用雜交瘤技能得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的符號物如酶標結合物則經過各種化學組成辦法制備。近年來,跟著分子生物學的開展,運用基因工程辦法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結合物等免疫測定試劑幾成為實際的新一代試劑,各種新式運用的測定辦法也不斷出現。

  HBsAg試劑特色(檢測形式:臨床抗體夾心法):包被抗體為山羊多抗。多抗具有高親和性和對抗原各種表位的反響性。酶表抗體為與HBsAg有不同結合位點的鼠復合單位,可測得HBsAg變異樣品,進步檢測的特異性(99.98%)進步檢測的靈敏度,應用Parl Ehrich 學說(PEI)HBsAg規范品,對ad規范品的靈敏度為0.05ng/ml對ay規范品靈敏度為0.025ng/ml

  ELISA試劑盒應用定性夾心免疫檢測技能,用組成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是我國型HEV毒株中心氨基酸序列中抗原性很強的肽段,別離來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或規范品參加孔中并孵育,如果其間存在HEV IgM抗體,這些抗體就會與HEV 的多肽抗原結合,并固定在上面,洗板除掉其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后參加羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結合物,經第2次孵育后,酶結合物就會與第一次孵育結合上的HEV IgM抗體相結合,洗板除掉未結合的酶結合物,參加TMB底物溶液,在第三次孵育時會發作酶-底物反響,只要那些含有HEV IgM抗體和酶結合物所構成的復合物的孔才會發作色彩改變,參加硫酸溶液停止酶和底物間的反響,并在波長: 450nm處測量O.D.值,依照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測驗規范, O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽性。


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