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ELISA試驗中如何防止產生氣泡

2018-08-06

  一般氣泡都是集合在酶標板的孔周圍,導致孔中液體不能與孔壁有用觸摸,使孔內反響不均一。

  包被時有氣泡的話,將導致包被不徹底實踐包被量下降--弱陽性乃至假陰性。

  關閉時有氣泡的話,將導致很多未結合位點的存在,引起非特異性結合--本底增高,假陽性。

  加樣時有氣泡的話,抗原抗體不能有用的結合--弱陽性乃至假陰性。

  加二抗時有氣泡的話,抗原抗體不能有用的結合--弱陽性乃至假陰性(競爭法相反----假陽性)。

  加顯色液時有氣泡的話---顯色不徹底。

  加停止液時有氣泡的話,1。不能徹底停止反響 2。影響酶標儀比色,OD值增高

  洗刷時有氣泡的話,非特異性結合物不能徹底洗去,做無用功。

  防止辦法:

  1。加樣時盡量接近孔底(不要觸摸孔底),用力均勻,不要過快過猛。

  2。關閉時一定要加滿孔,

  3。洗刷時一定要加滿孔(重要),氣泡會浮上來zui終驅除。手藝洗板時一定要吸干水分并用力拍干。


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