鵝ELISA試劑盒選用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被鵝半胱氨酸蛋白酶8(Casp-8)捕獲抗體的包被微孔中,順次參加標本、規范品、HRP符號的檢測抗體,通過溫育并徹底洗刷。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終究的黃色。色彩的深淺和樣品中的鵝半胱氨酸蛋白酶8(Casp-8)呈正相關。用酶標儀在450nm
波長下測定吸光度(OD
值),核算樣品濃度。用于體外定量檢測血清、血漿、安排、細胞上清及相關液體樣本中鵝半胱氨酸蛋白酶8(Casp-8)的含量。其標本處理如下:
1、 主張運用新鮮樣本,保存時刻過長可能會存在蛋白降解或變性導致試驗成果誤差。
2、運用化學裂解液制備的安排勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學物質的引進導致ELISA試驗成果誤差。
3、請運用者運用前充沛考慮到樣本的可能運用量,預留足夠的樣本。
4、某些天然蛋白或重組蛋白,包含原核及真核重組蛋白,可能由于與本產品所運用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出。
5、若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中,主張進行預試驗驗證其有效性,并注意留存樣本。
6、若樣本為細胞培養上清,因該類樣本攪擾要素較多,如:細胞狀況、細胞數量、采樣時刻等,所以可能存在檢測不出的狀況。
7、試驗前應猜測標本含量,假如標本濃度過高,應對標本進行稀釋,使稀釋后的標本契合鵝ELISA試劑盒的檢測規模,核算時再乘以相應的稀釋倍數。標本運用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。