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　　有很多一些新手ELISA試驗人員來說，試驗做得不理想是難免的事。這不，就在近期一個朋友找小編咨詢。這位朋友說道：“初度用間接法做ELISA試驗，做了幾回結果都沒有顯色，原因在哪里呢”

　　可能原因有這幾個方面：

　　1.包被原：包括你的包被液有無問題，有沒有配錯。包被原一般加100微升，37度2小時；

　　2.關閉：關閉液用的是否合適？你說做了幾回都沒顯色，空白孔也不顯嗎？假如空白也無色彩，那關閉就沒有問題。一般關閉是200微升每孔，也能夠滿孔關閉

　　3.一抗：查看你的一抗是否失效。是否是在37度反響

　　4.二抗：底物，底物緩沖液……這些都要好好查看！

　　5.洗刷：用PBST洗刷，包被和關閉時洗板3次；一抗二抗洗刷5次，每次間隔3分鐘。手工和機器洗刷沒什么不同，就是省力一些。洗5次不會有負影響，在一抗和二抗洗刷過程中，恰恰需求多洗幾回，這樣有助于削減非特異性吸附。