ELISA操作步驟
操作步驟
1. 從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自 封袋密封放回 4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品 50μ L;
3. 樣本孔先加待測樣本 10μL,再加樣本稀釋液 40μL;空白孔不 加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶 (HRP)標記的檢測抗體 100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋 或恒溫箱溫育 60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置 1min,甩去 洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板 5 次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
7. 每孔加入終止液 50μL,15min 內,在 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。
ELISA操作步驟
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