?ELISA的類型?
根據(ju)試劑的(de)(de)來源和樣本的(de)(de)情況以及檢測的(de)(de)具體條(tiao)件,可設計出(chu)各種不同類型的(de)(de)檢測方法,按照(zhao)原理及操作,市面的(de)(de)方法有:
?
1.間接法(fa)ELISA
是檢(jian)測抗(kang)體的(de)(de)方法,原理為利(li)用酶(mei)標記的(de)(de)二抗(kang)以檢(jian)測已(yi)與固相結合的(de)(de)受檢(jian)抗(kang)體,顯色測定(ding)。優勢在于待測一抗(kang)無需(xu)標記快速便捷。直接法ELISA與間接法ELISA相似(si),區別(bie)在(zai)于一抗酶標,檢測孵育(yu)也以抗原為主(zhu),但(dan)直接法ELISA的靈敏度有限,需(xu)權衡使用。
?
?2.夾(jia)心法ELISA
又分為雙抗原夾心法(fa)和雙抗體夾心法(fa)ELISA,原(yuan)理(li)相似,用于檢測(ce)抗(kang)(kang)體(ti)或抗(kang)(kang)原(yuan)含量。以雙抗(kang)(kang)體(ti)夾(jia)(jia)(jia)心(xin)法為例(li),捕(bu)獲(huo)抗(kang)(kang)體(ti)包被(bei)在固相載體(ti)上,加入抗(kang)(kang)原(yuan)或待測(ce)樣本結合(he),后加入的(de)檢測(ce)抗(kang)(kang)體(ti)結合(he)在抗(kang)(kang)原(yuan)上,形成(cheng)三明治(zhi)夾(jia)(jia)(jia)心(xin)形式(shi)。雙抗(kang)(kang)夾(jia)(jia)(jia)心(xin)法是(shi)市面*常見與方便分析的(de)方法。
3.競爭法ELISA
小(xiao)分子抗原與半抗原的檢(jian)測(ce)方(fang)法常用競爭法ELISA,待檢樣本中(zhong)抗原越多,被結(jie)合(he)的酶標(biao)抗原的量(liang)會減(jian)少,彼(bi)此形成競(jing)爭負相關體系,顯色物質(zhi)也就越少,根據顯色物質(zhi)的比例可擬合(he)得到待測抗原含量(liang)。
?4.其他方(fang)法
a.免疫抑制法測ELISA:固相包被抗(kang)(kang)原,被檢樣本對(dui)底物顯色(se)的抑(yi)制程度與(yu)樣本中所(suo)含抗(kang)(kang)原的量成正比,二者之差為待(dai)測抗(kang)(kang)原含量,原理類似(si)與(yu)競爭法ELISA。
b.阻斷ELISA:目的檢測(ce)(ce)(ce)特異性(xing)抗(kang)體,也稱為競(jing)爭(zheng)ELISA,原理為固(gu)相包被抗(kang)原,待(dai)測(ce)(ce)(ce)樣本(ben)與一抗(kang)酶(mei)標競(jing)爭(zheng)孵育,待(dai)檢樣本(ben)中(zhong)抗(kang)體越(yue)多,顯色(se)越(yue)淺,反則反之。非洲豬(zhu)瘟病毒抗(kang)體檢測(ce)(ce)(ce)試劑盒中(zhong)涉(she)及該法。
c.此(ci)外有(you)用于檢測IgM抗體(ti)的(de)(de)(de)抗體(ti)捕(bu)捉(zhuo)ELISA,有(you)固相載(zai)體(ti)改變的(de)(de)(de)Dot-ELISA(硝酸纖維素膜)和(he)C-ELISA(滌綸布(bu)),還(huan)有(you)技術分類(lei)的(de)(de)(de)TRFIA和(he)多因子檢測等(deng)。