Lgr5蛋白激活樹突狀細(xi)胞(bao)誘(you)導抗原特異性細(xi)胞(bao)毒T淋巴細(xi)胞(bao)治(zhi)療結腸癌的實驗
摘(zhai)要：目的(de)探討富(fu)含亮氨酸(suan)重復序列的(de)G蛋白(bai)(bai)耦聯受(shou)體5(Lgr5)蛋白(bai)(bai)激活樹突狀細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(DCs),誘導(dao)產(chan)生(sheng)CD8~+細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)毒(du)T淋(lin)巴細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(CTL)進(jin)(jin)行結腸(chang)癌(ai)(ai)免(mian)疫治療(liao)的(de)效果。方法利用Lgr5蛋白(bai)(bai)誘導(dao)DCs成熟,同時(shi)檢測(ce)DCs表面標記物和(he)白(bai)(bai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)介素(IL)-10與(yu)IL-12表達量的(de)變化,隨后通(tong)過(guo)Lgr5-DC誘導(dao)Lgr5抗原特異性CD8~+CTL,并檢測(ce)Lgr5-DC-CD8~+CTL對(dui)正常結腸(chang)上皮(pi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)CCD-18Co和(he)結腸(chang)癌(ai)(ai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)HT29的(de)作用,同時(shi)檢測(ce)干擾素(IFN)-γ釋放(fang)量。然后進(jin)(jin)一步(bu)檢測(ce)Lgr5-DC-CD8~+CTL對(dui)BALB/C-nu/nu小鼠結腸(chang)癌(ai)(ai)的(de)抑制情況,并通(tong)過(guo)組(zu)(zu)織染色(se)觀察治療(liao)后腫瘤(liu)組(zu)(zu)織的(de)變化。結果與(yu)PBS刺(ci)激相(xiang)比,Lgr5蛋白(bai)(bai)刺(ci)激能(neng)夠顯著(zhu)(zhu)上調DCs表面標記物DC80、DC83、DC86和(he)HLA-DR水(shui)平,依次達到(dao)3.29、3.06、2.90和(he)6.93倍;同時(shi)Lgr5蛋白(bai)(bai)刺(ci)激顯著(zhu)(zhu)促進(jin)(jin)IL-12的(de)釋放(fang)和(he)顯著(zhu)(zhu)減(jian)少IL-10的(de)分泌(P<0.05)。
Lgr5-DC-CD8~+CTL和(he)DC-CD8+CTL均(jun)導(dao)致(zhi)少量CCD-18Co細胞(bao)(bao)殺傷(P>0.05),而(er)Lgr5-DCCD8~+CTL對HT29細胞(bao)(bao)的殺傷率(lv)是DC-CD8~+CTL的4.40倍(P<0.05)。動(dong)物(wu)實驗表(biao)明,BALB/C-nu/nu結腸癌移植(zhi)鼠經(jing)Lgr5-DC-CD8+CTL治療后,腫(zhong)瘤體(ti)積(ji)比(bi)顯(xian)著低(di)于(yu)PBS組(zu)(zu)和(he)DC-CD8~+CTL組(zu)(zu),依次達到0.25和(he)0.24倍(P<0.05)。組(zu)(zu)織染色顯(xian)示,Lgr5-DC-CD8~+CTL處理(li)導(dao)致(zhi)明顯(xian)的腫(zhong)瘤組(zu)(zu)織病(bing)理(li)學改變,同時BAX表(biao)達升高。結論Lgr5蛋白促進DCs成熟(shu)并(bing)誘導(dao)產生Lgr5抗原特異性(xing)CD8~+CTL,Lgr5-DC-CD8~+CTL能夠高效(xiao)的殺傷腫(zhong)瘤細胞(bao)(bao)并(bing)延(yan)遲腫(zhong)瘤生長。
關鍵詞(ci)：富含殼(ke)氨酸重復序列的G蛋白耦(ou)聯受體;樹突狀(zhuang)細(xi)胞;細(xi)胞毒T淋巴(ba)細(xi)胞;結腸癌;免疫(yi)治療;小(xiao)鼠
白細胞介素(IL)-4、 粒(li)細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF) 、Lgr5 抗原
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