小鼠雌二醇（E2）ELISA試劑盒一、檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被I型膠原（Col I）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成＊終的黃色。顏色的深淺和樣品中的I型膠原（Col I）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。二、樣品收集、處理及保存方法1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。3. 細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。三、自備物品酶標儀（450nm）高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱四、操作注意事項 試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正常現象，水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。 濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經稀釋5倍，＊終結果乘以5才是樣本實際濃度。 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。 所有液體組分使用前充分搖勻。五、試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標板12孔×8條12孔×4條無標準品0.3mL*6管0.3mL*6管無樣本稀釋液6mL3mL無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無注：標準品（S0-S5）濃度依次為：0、2、4、8、16、32 ng/mL六、試劑的準備 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。七、洗板方法 手工洗板：甩盡孔內液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。 自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。八、操作步驟 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL； 樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。 每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。九、結果判斷 繪制標準曲線：在Excel工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應OD值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。十、試劑盒性能 準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值，大于等于0.9500。 靈敏度：檢測范圍1-36ng/mL，**檢測濃度小于0.1 ng/mL。 特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。 重復性：板內、板間變異系數均小于15%。 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。 有效期：6個月十一、免責聲明 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。 嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。
嘔吐毒素為白色針狀結晶，熔點為151 ~153℃（醋酸乙基石油）。不飽和酮基的存在使得其在短波紫外下有吸收峰，但與許多其它物質在此處的紫外吸收峰相重疊，屬非特征性的。紫外輻射下不顯熒光。DON易溶于極性的溶劑如水、甲醇、乙醇、乙腈、丙酮和乙酸乙酯，不溶于正已烷、丁醇、石油醚。鼠抗嘔吐毒素單克隆抗體說明書【中文名稱】鼠抗嘔吐毒素單克隆抗體【英文名稱】Mouse Anti-vomiting Toxin Monoclonal Antibody【貨 號】DM-Ab0180【來 源】Balb/c 小鼠【亞 型】IgG 【物理性狀】液體，避免反復凍融【ELISA 效價】 0.005M PBS 體系下1:200000 以上 【IC50 】30ppb（μg/Kg）【緩沖液】0.01M PBS PH7.4 不加防腐劑【儲存及有效期】-20℃以下3 年，避免反復凍融【相關產品】鼠抗黃曲霉毒素B1單克隆抗體；鼠抗黃曲霉毒素總量單克隆抗體；鼠抗黃曲霉毒素M1單克隆抗體 嘔吐毒素偶聯免疫全抗原說明書【中文名稱】嘔吐毒素偶聯全抗原【英文名稱】Vomitoxin-Protein Conjugate【貨 號】DM-Ag0180【蛋白載體】牛血清白蛋白/卵清白蛋白/匙孔血藍蛋白BSA/OVA/KLH【物理性狀】液體，避免反復凍融【ELISA效價】 0.005M PBS 體系下1:30000以上【免疫層析效價】 1:40以上，偶聯比大于1:60 【免疫原偶聯位點】3-OH √ /15-0H【蛋白濃度】5.0 mg/ml【緩沖液】0.01M PBS PH7.4無防腐劑【儲存條件】-20℃以下【有效期】2年，避免反復凍融
菌種說明 提示：請嚴格按照說明書操作,如未按說明書操作，本中心不承擔售后。 本中心目前有標準菌種（斜面、甘 油菌、穿刺菌和凍干粉四種形式）、基因工程菌種（斜面、甘油 菌和穿刺菌三種形式）、食用益生菌和工 業發酵菌種，基本涵蓋了環境、工業、農業、分析、食品、藥 用真菌等各類生產和科研微生物。 一 菌種簡介 菌種名稱 牙齦卟啉單胞菌 編號 ATCC33277 規格 培養皿 菌種主要應用 二 保存條件 斜面、穿刺菌和凍干粉可常溫運輸，但應在4-10度長期保存。甘油菌可常溫運輸，但應在-80度長期 保存。微生物菌種應保存于低溫、清潔和干燥的地方，室溫放置時間過長會導致菌種衰退。 三 培養條件 培養基 血瓊脂平板 培養溫度 37 度 培養時間 2-5 天 培養條件 嚴格厭氧 四 活化步驟 培養皿培養物首次傳代，先用75%酒精將斜面硅膠塞處擦拭，然后酒精燈旁燒一下消毒，然后開啟硅膠塞， 用接種針（細菌類）或接種鏟（霉菌類）取一點菌種，然后接種到新的斜面試管上（劃線涂布都可以）。 也可以接種到液體培養基中做搖菌培養。剩余的菌種可以按照保存條件放到相應條件保存。如果有不明白 之處，應先與我中心聯系，避免不必要的損失(4009681786,微信：)。 五 注意事項 1 微生物菌種應保存于低溫、清潔和干燥的地方，室溫放置時間過長會導致菌種衰退； 2 菌種操作在無菌條件下進行，接種完畢應該滅菌再做丟棄處理； 3 斜面菌種和穿刺菌種保存時間通常 為 3-6 個月，應根據菌種狀況及時結轉；凍干粉保存時間通常是2-25年；甘油菌保存時間為2-5年
大鼠血管內皮細胞生長因子A(VEGF-A)ELISA試劑盒中文名稱大鼠血管內皮細胞生長因子A(VEGF-A)ELISA試劑盒規格96T/48T樣本類型血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液等使用范圍科研實驗，不得用于臨床診斷反應時間1-5h試劑盒保存2-8℃有效期6個月貨期現貨【操作步驟】1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在第一、第二孔中分別加標準品100μl，然后在第一、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從第一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為3 μg/L，2μg/L ，1.0μg/L，0.5μg/L，0.25μg/L）。2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品＊終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。7. 溫育：操作同3。8. 洗滌：操作同5。9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。【注意事項】1． 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2． 濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3． 各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間＊好控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。4． 請每次測定的同時做標準曲線，＊好做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請＊后乘以總稀釋倍數（×n×5）。5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6． 底物請避光保存。7． 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.8． 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9． 本試劑不同批號組分不得混用。10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。【計算】 以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標， 在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD 值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋 倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標 準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值 代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋 倍數，即為樣品的實際濃度。 【試劑盒組成】試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份密封袋1個1個封板膜12孔×4條2片（96）2-8℃保存微孔酶標板1×4812孔×8條2-8℃保存標準品0.3mL*6管0.3mL*6管2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存注意：使用前請檢查試劑盒中試劑的標簽和數量與表格是否一致。【精密度】精密度用樣品測定值的變異系數CV 表示。CV（%） = SD/mean×100批內差：取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測，每份樣本連續測定20 次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD 值。批內差： CV<9%批間差：選取3 個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進行定量測定，每個樣本使用同一試劑盒重復測定10 次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD 值。批間差： CV<11% 【特異性】本試劑盒識別天然和重組微生物硝酸鹽還原酶（Nar），經檢測與其它相似物質無明顯交叉反應。由于受到技術及樣本來源的限制，不可能完成所有相關或相似物質交叉反應檢測，因此本試劑盒有可能與未經檢測的其它物質有交叉反應。 【穩定性】試劑盒在有效期內務必按推薦溫度保存，活性降低率小于5%。為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響，實驗室的環境條件需盡量保持一致，尤其是實驗室內溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。
CTCF Monoclonal Antibody Catalog No DM-00964 Isotype IgG Reactivity Human;Monkey Applications WB;ELISA Gene Name CTCF Protein Name Transcriptional repressor CTCFImmunogen Purified recombinant fragment of human CTCF expressed in E. Coli. Specificity CTCF Monoclonal Antibody detects endogenous levels of CTCF protein. Formulation Ascitic fluid containing 0.03% sodium azide,0.5% BSA, 50%glycerol. Source Monoclonal, Mouse Purification Affinity purificationDilution Western Blot: 1/500 - 1/2000. ELISA: 1/10000. Not yet tested in other applications. Concentration 1 mg/ml Purity ≥90% Storage Stability -20°C/1 year Synonyms CTCF; Transcriptional repressor CTCF; 11-zinc finger protein; CCCTC-binding factor; CTCFL paralog Observed Band Cell Pathway Nucleus, nucleoplasm . Chromosome . Chromosome, centromere . May translocate to the nucleolus upon cell differentiation. Associates with both centromeres and chromosomal arms during metaphase. Associates with the H19 ICR in mitotic chromosomes. May be preferentially excluded from heterochromatin during interphase. Tissue Specificity Ubiquitous. Absent in primary spermatocytes. Function function:Transcriptional repressor binding to promoters of vertebrate c-myc gene. Also binds to the PLK and PIM1 promoters. May prevent the access of transcriptional activators to enhancers. Also acts as a transcriptional activator of APP. Involved in different aspects of gene regulation including promoter activation or repression, hormone-responsive gene silencing, methylation-dependent chromatin insulation, and genomic imprinting. Seems to act as tumor suppressor.,similarity:Belongs to the CTCF zinc-finger protein family.,similarity:Contains 11 C2H2-type zinc fingers.,subunit:Interacts with CHD8.,tissue specificity:Ubiquitous. Absent in primary spermatocytes.,Background This gene is a member of the BORIS + CTCF gene family and encodes a transcriptional regulator protein with 11 highly conserved zinc finger (ZF) domains. This nuclear protein is able to use different combination
ZN143 rabbit pAb Catalog No DM-09315 Isotype IgGReactivity Human;Mouse;Rat Applications WB Gene Name ZNF143 SBF STAF Protein Name Zinc finger protein 143 (SPH-binding factor) (Selenocysteine tRNA gene transcription-activating factor) (hStaf) Immunogen Synthesized peptide derived from human ZN143 AA range: 518-568 Specificity This antibody detects endogenous levels of human ZN143 Formulation Liquid in PBS containing 50% glycerol, 0.5% BSA and 0.02% sodium azide. Source Polyclonal, Rabbit,IgG Purification The antibody was affinity-purified from rabbit serum by affinity-chromatography using specific immunogen. Dilution WB 1:1000-2000 Concentration 1 mg/ml Purity ≥90% Storage Stability -20°C/1 year Synonyms Observed Band Cell Pathway Nucleus . Tissue Specificity Expressed in all tissues tested, with the strongest expression in ovary. Function Background matters needing attention Avoid repeated freezing and thawing! Usage suggestions This product can be used in immunological reaction related experiments. For more information, please consult technical personnel.
Elf-1 Polyclonal Antibody Catalog No DM-01689 Isotype IgGReactivity Human Applications WB;IHC;IF;ELISA Gene Name ELF1 Protein Name ETS-related transcription factor Elf-1 Immunogen The antiserum was produced against synthesized peptide derived from human ELF1. AA range:537-586 Specificity Elf-1 Polyclonal Antibody detects endogenous levels of Elf-1 protein. Formulation Liquid in PBS containing 50% glycerol, 0.5% BSA and 0.02% sodium azide. Source Polyclonal, Rabbit,IgG Purification The antibody was affinity-purified from rabbit antiserum by affinity-chromatography using epitope-specific immunogen. Dilution Western Blot: 1/500 - 1/2000. Immunohistochemistry: 1/100 - 1/300. Immunofluorescence: 1/200 - 1/1000. ELISA: 1/20000. Not yet tested in other applications. Concentration 1 mg/ml Purity ≥90% Storage Stability -20°C/1 year Synonyms ELF1; ETS-related transcription factor Elf-1; E74-like factor 1 Observed Band 67kD Cell Pathway Nucleus. Tissue Specificity In fetal tissues, it is highly expressed in heart, lung liver and kidney, and weakly expressed in brain. In adult, it is highly expressed in pancreas, spleen, thymus and peripheral blood leukocytes, expressed at moderate levels in heart, placenta, lung, liver, skeletal muscle, kidney, prostate, ovary, small intestine and colon, and weakly expressed in brain and testis. Function function:Transcription factor that activates the LYN and BLK promoters. Appears to be required for the T-cell-receptor-mediated trans activation of HIV-2 gene expression. Binds specifically to two purine-rich motifs in the HIV-2 enhancer.,PTM:Phosphorylated upon DNA damage, probably by ATM or ATR.,similarity:Belongs to the ETS family.,similarity:Contains 1 ETS DNA-binding domain.,subunit:Binds to the underphosphorylated form of RB. May interact with other transcription factors in order to regulate specific genes. Interacts with RUNX1.,tissue specificity:In fetal tissue, it is highly expressed in heart, lung liver and kidney, and weakly expressed in brain. In adult, it
Kinase experiment [1]: Preparation Method Prior to use, the [8-14C] adenosine was checked for purity using isocratic HPLC elution. The assay incubation mixture contained 0.4 IU of enzyme in 50 L. The metabolites were separated by thin-layer chromatography. The radioactivity was quantitated by cutting the plastic backed TLC plates and placing them in scintillation vials, and counting in a Packard 2000 CA scintillation counter Applications IC50: 0.15 (HIV-1, A012 isolate), 0.20 μM (HIV-1, A018 isolate). 3-Deazaadenosine (hydrochloride) is an inhibitor of S-adenosylhomocysteine hydrolase, with a Ki of 3.9 μM. Cell experiment [2]: Cell lines Mouse macrophage RAW 264.7 Preparation Method RAW 264.7 cells were pretreated with or without 3-Deazaadenosine (100 μMM) for 1 h, and stimulated by the addition of LPS (1 μg/ml). After incubation for 1 h, the cells were washed, and p65 was recovered by immunoprecipitation with anti-p65 and protein A-Sepharose. Reaction Conditions 0-100 μM 3-Deazaadenosine for 1 hour Applications 3-Deazaadenosine (1-100 ?M) inhibits LPS-induced expression of TNF-α mRNA, increases DNA binding activity of NF-κB, and causes proteolytic degradation of IκBα, but Not IκBβ in RAW 264.7 cells. 3-Deazaadenosine (100 μM) enhances nuclear translocation of NF-κB, but blocks LPS-induced NF-κB transcriptional activity, and such inhibition is augmented by the addition of homocysteine. Animal experiment [3]: Animal models Male, healthy Sprague–Dawley rats (300?50 g) Preparation Method Animals and balloon injury: rats were fed for 5 days prior and 14 days after the balloon injury with standard chow containing c3Ado at a concentration of 10 mg/kg 3-Deazaadenosine body weight. Dosage form 10 mg/kg 3-Deazaadenosine for 5 days prior and 14 days after the balloon injury Applications 3-deazaadenosine (c3Ado) inhibits atherogenesis in mice. Sprague Dawley rats underwent balloon angioplasty. C3Ado was administered orally, starting 5 days prior to the balloon injury and continued for 2 weeks. Fourteen days afte
小鼠胰島素樣生長因子 1（IGF-1）實驗原理 試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被脂肪酸結合蛋白1(FABP1)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成＊終的黃色。顏色的深淺和樣品中的脂肪酸結合蛋白1(FABP1)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。保存條件及有效期本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中脂肪酸結合蛋白1(FABP1)的含量。有效期：6個月保存條件：2-8℃小鼠胰島素樣生長因子 1（IGF-1）一、標本的采集及保存 1.血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 3.細胞培養物上清或其它生物標本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 注：標本溶血會影響檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。二、標本的稀釋原則 首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量，確定適當的稀釋倍數。只有稀釋至標準曲線的范圍內，檢測的結果才是準確的。稀釋的過程中，應做好詳細的記錄。計算濃度時，稀釋了“N”倍，標本的濃度應再乘以“N”。 1.標準品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為300 pg/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內配制。 如配制150 pg/ml標準品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。2.生物素標記抗體的稀釋原則： 臨用前以生物素標記抗體稀釋液稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標記抗體加990μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。3.辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則： 臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。 操作步驟 實驗開始前，請提前配置好所有試劑，試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。 小鼠胰島素樣生長因子 1（IGF-1）三、操作步驟1.加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。 為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。2.棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl（取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制），37℃,60分鐘。 3.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。 4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液（同生物素標記抗體工作液） 100μl，37℃，60分鐘。 5.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。 6.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。 7.依序每孔加終止溶液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。 8.用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。 四、試劑盒使用小技巧1. 用戶在初次使用試劑盒時，應將各種試劑管離心數分鐘，以便試劑集中到管底。2. 每次實驗留一孔作為空白調零孔，該孔不加任何試劑，只是**加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。 3. 為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜。 4. 未使用完的酶標板或者試劑，請于2-8℃保存。標準品、生物素標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、生物素標記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標記親和素工作液。 5. 建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。 洗板方法 手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標板內的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內，浸泡1-2分鐘。根據需要，重復此過程數次。 自動洗板：如果有自動洗板機，應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。 計算 以標準物的濃度為橫坐標（對數坐標），OD值為縱坐標（普通坐標），在半對數坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。 五、技術小提示1.當混合蛋白溶液時應盡量輕緩，避免起泡。2. 洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。 3. 一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。 4. 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。 5. 如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請乘以稀釋倍數。 6. 在配制標準品、檢測溶液工作液時，請以相應的稀釋液配制，不能混淆。 7. 底物請避光保存。 8. 不要用其它生產廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。 六、注意事項1.收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4 ℃備用，如有特殊原因需要周期收集標本， 將標本及時分裝后放在-20 ℃或-70 ℃條件下保存。避免反復凍融。2.標本2 -8 ℃可保存48 小時，-20 ℃可保存1 個月。-70度可保存6 個月。3.部分激素類標本需添加抑肽酶。 4.計算方法：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。 七、試劑盒性能1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.92以上。2.批內與批見應分別小于9%和15% 八、保存條件及有效期1.試劑盒保存：2-8℃。 2．有效期：6個月
小鼠神經膠質纖維酸性蛋白（GFAP）實驗原理 試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被脂肪酸結合蛋白1(FABP1)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成＊終的黃色。顏色的深淺和樣品中的脂肪酸結合蛋白1(FABP1)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。保存條件及有效期本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中脂肪酸結合蛋白1(FABP1)的含量。有效期：6個月保存條件：2-8℃小鼠神經膠質纖維酸性蛋白（GFAP）一、標本的采集及保存 1.血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 3.細胞培養物上清或其它生物標本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 注：標本溶血會影響檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。二、標本的稀釋原則 首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量，確定適當的稀釋倍數。只有稀釋至標準曲線的范圍內，檢測的結果才是準確的。稀釋的過程中，應做好詳細的記錄。計算濃度時，稀釋了“N”倍，標本的濃度應再乘以“N”。 1.標準品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為300 pg/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內配制。 如配制150 pg/ml標準品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。2.生物素標記抗體的稀釋原則： 臨用前以生物素標記抗體稀釋液稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標記抗體加990μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。3.辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則： 臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。 操作步驟 實驗開始前，請提前配置好所有試劑，試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。 小鼠神經膠質纖維酸性蛋白（GFAP）三、操作步驟1.加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。 為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。2.棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl（取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制），37℃,60分鐘。 3.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。 4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液（同生物素標記抗體工作液） 100μl，37℃，60分鐘。 5.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。 6.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。 7.依序每孔加終止溶液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。 8.用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。 四、試劑盒使用小技巧1. 用戶在初次使用試劑盒時，應將各種試劑管離心數分鐘，以便試劑集中到管底。2. 每次實驗留一孔作為空白調零孔，該孔不加任何試劑，只是**加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。 3. 為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜。 4. 未使用完的酶標板或者試劑，請于2-8℃保存。標準品、生物素標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、生物素標記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標記親和素工作液。 5. 建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。 洗板方法 手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標板內的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內，浸泡1-2分鐘。根據需要，重復此過程數次。 自動洗板：如果有自動洗板機，應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。 計算 以標準物的濃度為橫坐標（對數坐標），OD值為縱坐標（普通坐標），在半對數坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。 五、技術小提示1.當混合蛋白溶液時應盡量輕緩，避免起泡。2. 洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。 3. 一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。 4. 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。 5. 如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請乘以稀釋倍數。 6. 在配制標準品、檢測溶液工作液時，請以相應的稀釋液配制，不能混淆。 7. 底物請避光保存。 8. 不要用其它生產廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。 六、注意事項1.收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4 ℃備用，如有特殊原因需要周期收集標本， 將標本及時分裝后放在-20 ℃或-70 ℃條件下保存。避免反復凍融。2.標本2 -8 ℃可保存48 小時，-20 ℃可保存1 個月。-70度可保存6 個月。3.部分激素類標本需添加抑肽酶。 4.計算方法：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。 七、試劑盒性能1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.92以上。2.批內與批見應分別小于9%和15% 八、保存條件及有效期1.試劑盒保存：2-8℃。 2．有效期：6個月
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