NAD激酶(NADK)測試盒本品用于科研實驗,不用于臨床。測定意義:輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循環(TCA)的主要氫受體,生成的?NADH?經呼吸電子鏈(ETC)傳遞把電子交給氧,在合成?ATP?的同時,形成大量的?ROS,同時?NADH?再生為?NAD+。糖、脂、蛋白質三大代謝物質分解中的氧化反應絕大部分通過這一體系完成。NAD(H)含量和?NADH/NAD+比值的高低可用于評價糖酵解和?TCA?循環的強弱。較高的NAD(H)及?NADH/NAD+比值說明細胞呼吸耗氧量較高,處于過氧化狀態。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和?TCA?循環。另外,NAD+降解產物對細胞信號傳導、代謝和基因表達等具有重要的調控作用。測定原理:分別用酸性和堿性提取液提取樣品中?NAD+和?NADH,NADH?通過?PMS?的遞氫作用,還原氧化型噻唑藍(MTT)為甲瓚,在?570nm?下檢測吸光值;而?NAD+可被乙醇脫氫酶還原為?NADH,進一步采用?MTT?還原法檢測。需自備的儀器和用品:酶標儀、臺式離心機、移液器、96?孔板、研缽、冰和蒸餾水。試劑的組成和配制:酸性提取液:液體?50mL×1?瓶,4℃保存;堿性提取液:液體?50mL×1?瓶,4℃保存;試劑一:液體?10 mL×1?瓶,4℃保存;試劑二:液體?3 mL×1?瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1?瓶,-20?℃保存,用時加入?3mL?蒸餾水,混勻,用不完的試劑?4℃保存一周;試劑四:粉劑×1?瓶,4?℃保存,用時加入?3mL?蒸餾水,混勻,用不完的試劑?4℃保存一周;試劑五:液體?3.6mL×1?瓶,4?℃保存;試劑六:液體?30mL×1?瓶,4?℃保存;試劑七:液體?50mL×1?瓶,4?℃保存。NAD+和?NADH?的提取:1?血清(漿)中?NAD+和?NADH?的提取:NAD+的提取:按照血清(漿)體積(mL):酸性提取液體積(mL)為?1:5~10?的比例(建議取約?0.1mL?血清(漿),加入?1mL?酸性提取液),95℃水浴?5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4?℃離心?10min;取?500μL?上清液,加入?500μL?堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4?℃離心?10min,取上清,置冰上待測。NADH?的提取:按照血清(漿)體積(mL):堿性提取液體積(mL)為?1:5~10?的比例(建議取約?0.1mL血清(漿),加入?1mL?堿性提取液),95℃水浴?5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4?℃離心?10min;取?500μL?上清液,加入?500μL?酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4?℃離心?10min,取上清,置冰上待測。2?組織中?NAD+和?NADH?的提取:NAD+的提取:按照組織質量(g):酸性提取液體積(mL)為?1:5~10?的比例(建議取約?0.1g?組織,加入?1mL酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴?5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4?℃離心10min;取?500μL?上清液,加入?500μL?堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4?℃離心?10min,取上清,置冰上待測。NADH?的提取:按照組織質量(g):堿性提取液體積(mL)為?1:5~10?的比例(建議取約?0.1g?組織,加入?1mL堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴?5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4?℃離心10min;取?500μL?上清液,加入?500μL?酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4?℃離心?10min,取上清,置冰上待測。3?細胞或細菌中?NAD+和?NADH?的提取:NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104?個):酸性提取液體積(mL)為?500~1000:1?的比例(建議?500?萬細菌或細胞加入?1mL?酸性提取液),超聲波破碎(冰浴,功率20%或?200W,超聲?3s,間隔?10s,重復?30?次),95℃水浴?5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4?℃離心?10min;取?500μL?上清液,加入?500μL?堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4?℃離心10min,取上清,置冰上待測。NADH?的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104?個):堿性提取液體積(mL)為?500~1000:1?的比例(建議?500?萬細菌或細胞加入?1mL?堿性提取液),超聲波破碎(冰浴,功率20%或?200W,超聲?3s,間隔?10s,重復?30?次),95℃水浴?5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4?℃離心?10min;取?500μL?上清液,加入?500μL?酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4?℃離心10min,取上清,置冰上待測。充分混勻,靜置?5min?后,20000g,25℃離心?5min,棄上清,沉淀中加入:混勻,取?200μL?轉移至微量石英比色皿或?96?孔板中,570nm?下讀取對照吸光值?A1?和測定管吸光值?A2,計算△A=A2-A1。注意事項:1、如果一次性測定樣本數較多,可將試劑一、二、三和四按比例配成混合液。2、對照管和測定管的測定步驟的區別:對照管加完試劑一、二、三、四和五后必須馬上加試劑六;測定管加完試劑一、二、三、四和五后必須反應?20min?后再加試劑六。3、反應過程中注意避光。4、若?NAD+測定中△A(A2-A1)≤0.0302,NADH?測定中△A(A2-A1)≤0.0222,說明樣本中輔酶含量較低,已低于檢測限,可做如下調整:(1)將測定管避光靜置時間?20min?延長到?60min;(2)在提取階段增加取樣量,即取?0.2g?樣本或?0.2mL?樣本加入?1mL?提取液。5、由于每一個測定管需要設一個對照管,本試劑盒?100?管保證測?48?個?NAD+或?NADH.NAD+和?NADH?含量的計算:(一) NAD+含量的計算標準條件下的回歸曲線為?y = 0.1475x + 0.0302,R2 = 0.9978;其中?y?為△A,x?為?NAD+濃度?nmol/mL1、血清(漿)中?NAD+含量計算NAD+含量(nmol/mL)=[(△A -0.0302)÷0.1475×V1) ]÷(V3×V1÷V2)=135.6×(△A -0.0302)2、組織、細菌或細胞中?NAD+含量計算(1)按樣本蛋白濃度計算NAD+(nmol/mg prot)=[(△A -0.0302)÷0.1475×V1)]÷(V1×Cpr)= 6.8×(△A -0.0302)÷Cpr(2)按樣本鮮重計算NAD+(nmol/g?鮮重)= [(△A -0.0302)÷0.1475×V1)]÷(W×V1÷V2)= 13.6×(△A -0.0302)÷W(3)按細菌或細胞密度計算NAD+(nmol/104 cell)=[(△A -0.0302)÷0.1475×V1)]÷(500×V1÷V2)=0.027×(△A -0.0302)(二)NADH?含量的計算標準條件下的回歸曲線為?y = 0.1404x + 0.0222,R2 = 0.9976;其中?y?為△A,x?為?NADH?濃度?nmol/mL1、血清(漿)中?NADH?含量計算NADH?含量(nmol/mL)= [ (△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(V3×V1÷V2)= 142.5×(△A -0.0222)2、組織、細菌或細胞中?NADH?含量計算(1)按樣本蛋白濃度計算NADH (nmol/mg prot)= [ (△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(V1×Cpr)= 7.1×(△A -0.0222)÷Cpr(2)按樣本鮮重計算NADH (nmol/g?鮮重)=[(△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(W×V1÷V2)= 14.2×(△A -0.0222)÷W(3)按細菌或細胞密度計算NADH (nmol/104 cell)= [ (△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(500×V1÷V2)=0.028×(△A -0.0222)V1:加入反應體系中樣本體積,0.02mL;V2:加入提取液體積,2mL;V3:加入血清(漿)體積:0.1mL;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL; W:樣本質量,g;500:細胞或細菌總數,500?萬。注?意:?檢測限為?0.1nmol/mL?或?0.1nmol/g?鮮重?或?0.001nmol/mg protNAD激酶(NADK)測試盒生化試劑盒可以檢測的樣本類型有哪些???生化試劑盒的實驗原理是基于化學反應,理論上是不受生物種屬及樣本類型的限制。生化試劑盒樣本檢測通常只分樣本類型,不分種屬。但是某些指標在不同種屬或類型樣本中的提取方式不同。因此,具體情況請參見說明書或與技術支持聯系確認。生化試劑盒樣本檢測的一般要求:1)于生化檢測而言,樣本無溶血、脂血、的現象。組織樣本需將血液洗凈擦干后再進行稱重處理。2)樣本處理后盡快進行檢測,且保存于冰盒之上,待測。求3)樣本需澄清,若不澄清,需離心后取上清進行檢測(特殊指標除外)。4)樣本值應在試劑盒線性范圍內,若超過線性范圍,需稀釋后再進行檢測,若低于檢測范圍,需增加樣本濃度后進行檢測。微量法和分光光度法的區別?分光光度法:主流測定體系為1mL,測試儀器分光光度計,能夠大限度地滿足絕大多數用戶的需要。微量法:主流測定體系為0.2mL,測試儀器或分光光度計,測定更加簡便快捷。試劑盒規格中是100管和50管是什么意思?(1)50管/48樣:50管指能夠做50次測定,48樣指可以測試48個樣品。如果每個樣品重復測定3次,那么只能測定16個樣品。其中有2次測定用于空白管或者對照管。值得特別注意的是,50管/24樣中由于每個樣品測定都需要做對照,因此能夠測定樣品的數量僅為8個(假設做3次重復)(2)100管/96樣:100管指能夠做100次測定,96樣指可以測定96個樣品,如果每個樣品重復測定3次,那么只能測定32個樣品。其中有4次測定用于空白管或者對照管。注意由于瓶璧和移液器吸附等,通常要比理論測定次數少1~3次。其它規格的含義依次類推。值得特別注意的是,100管/48樣中由于每個樣品測定都需要做對照,因此能夠測定樣品的數量僅為16個(假設做3次重復)。如何防止試劑盒失效?????不要過早訂購,以免試劑盒失效.收到試劑盒后,檢查外包裝是否正常。馬上打開,按照試劑盒說明書核對試劑數量是否正確,注意瓶中試劑狀態是否與說明書一致。如果有問題,或者懷疑,馬上聯系公司銷售,進行確認。如果沒有問題,請務必按照說明書進行試劑的保存。注意,不同試劑,可能需要分別保存在常溫(25°℃)、4℃和-20℃,務必分別按照要求保存,不要整個試劑盒放置于冰箱。如何進行預測定?(1)務必在7個工作日內進行預測定,以確定該試劑盒是否適合您的樣品,以免造成試劑盒和樣品的浪費。(2)選擇2~3個預期差異比較大的樣品,嚴格按照說明書進行操作,注意儀器工作狀態,操作規范,控制好測定條件,尤其是溫度。(3)如實與公司銷售溝通預測定結果,公司技術人員會確認測定結果是否正常,是否需要調整,如何進行調整,從而確保您的測定結果可靠。比色皿有哪些規格?(1)常量比色皿,如1mL和3mL等,常量法試劑盒都是選用1mL體系,只能用1mL比色皿,不可以用更大體積的比色皿,否則試劑量不夠,無法正常比色。(2)微量比色皿,如0.25mL和0.5mL等,微量法試劑盒都是選用0.25mL比色皿。一般客戶都選擇使用標儀(需要自備酶標板)(3)紫外波長檢測需要石英比色皿,不可以用普通玻璃比色皿。(4)不同規格的比色皿,其外觀大小是一致的,都是1cm光徑(也有0.5cm光徑的比色皿,不常見,也可以用,但是計算時要注意修改計算公式),其內容積差異在于壁的厚度。代測的優點(1)更加省事兒,完全不必為測定犯難。用戶只要提供樣品和想測定的指標,就不再需要為測定操心了,不再受到操作技能、儀器設備和時間的限制,就等著拿到數據寫論文。(2)測定數據更有保障。嚴格的測定質量管理體系,從而保證了測定結果的真實可靠。我們還建立了免費預測定制度。(3)防止樣品損失無論是用戶自己完成測定全過程,還是購買試劑盒完成測定,都可能因為缺乏測定經驗,導致測定失敗,從而損失樣品的情況。對于生命科學研究而言,樣品是*珍貴的。樣品一旦損失,輕則造成研究進度被耽擱,重則造成研究完全失敗!代測能夠充分保證測定成功,從而防止了樣品損失。當然,樣品質量是測定成功的前提,而且樣品質量只有用戶自己才能控制和保證。生化檢測試劑盒的基本原理??生化檢測試劑盒,又稱生化試劑盒,是利用特定的生物成分、動力學及化學反應等技術制備的試劑盒,用于檢測生理學、病理學、藥理學等領域中特定的生物分子或化學物質。生化檢測試劑盒包括底物、酶試劑盒、探針等多個組成部分,其中*常用的是底物-酶法。底物-酶法是生化檢測試劑盒檢測的基本原理。在該過程中,底物與酶在細胞膜上結合形成基質酶,進而形成底物-酶復合物。隨著時間的推移,底物-酶復合物逐漸分解,釋放出分子小的底物和分子大的未完全消化的底物。未完全消化的底物可以被一系列的酶代謝,同時底物、酶和代謝產物都會對復合物的穩定性產生影響,從而影響檢測試劑盒的檢測結果。生化試劑盒可以檢測的樣本類型有哪些?? ?生化試劑盒的實驗原理是基于化學反應,理論上是不受生物種屬及樣本類型的限制。生化試劑盒樣本檢測通常只分樣本類型,不分種屬。但是某些指標在不同種屬或類型樣本中的提取方式不同。因此,具體情況請參見說明書或與技術支持聯系確認。生化試劑盒樣本檢測的一般要求:1)于生化檢測而言,樣本*-好無溶血、脂血、黃-疸的現象。組織樣本需將血液洗凈擦干后再進行稱重處理。2)樣本處理后*-好盡快進行檢測,且保存于冰盒之上,待測。3)樣本需澄清,若不澄清,需離心后取上清進行檢測(特殊指標除外)。4)樣本值應在試劑盒線性范圍內,若超過線性范圍,需稀釋后再進行檢測,若低于檢測范圍,需增加樣本濃度后進行檢測。
?輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒? ?本品用于科研實驗,不用于臨床。測定意義:輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循環(TCA)的主要氫受體,生成的 NADH 經呼吸電子鏈(ETC)傳遞把電子交給氧,在合成 ATP 的同時,形成大量的 ROS,同時 NADH 再生為 NAD+。糖、脂、蛋白質三大代謝物質分解中的氧化反應絕大部分通過這一體系完成。NAD(H)含量和 NADH/NAD+比值的高低可用于評價糖酵解和 TCA 循環的強弱。較高的NAD(H)及 NADH/NAD+比值說明細胞呼吸耗氧量較高,處于過氧化狀態。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和 TCA 循環。另外,NAD+降解產物對細胞信號傳導、代謝和基因表達等具有重要的調控作用。測定原理:分別用酸性和堿性提取液提取樣品中 NAD+和 NADH,NADH 通過 PMS 的遞氫作用,還原氧化型噻唑藍(MTT)為甲瓚,在 570nm 下檢測吸光值;而 NAD+可被乙醇脫氫酶還原為 NADH,進一步采用 MTT 還原法檢測。需自備的儀器和用品:酶標儀、臺式離心機、移液器、96 孔板、研缽、冰和蒸餾水。試劑的組成和配制:酸性提取液:液體 50mL×1 瓶,4℃保存;堿性提取液:液體 50mL×1 瓶,4℃保存;試劑一:液體 10 mL×1 瓶,4℃保存;試劑二:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1 瓶,-20 ℃保存,用時加入 3mL 蒸餾水,混勻,用不完的試劑 4℃保存一周;試劑四:粉劑×1 瓶,4 ℃保存,用時加入 3mL 蒸餾水,混勻,用不完的試劑 4℃保存一周;試劑五:液體 3.6mL×1 瓶,4 ℃保存;試劑六:液體 30mL×1 瓶,4 ℃保存;試劑七:液體 50mL×1 瓶,4 ℃保存。NAD+和 NADH 的提取:1 血清(漿)中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提取:按照血清(漿)體積(mL):酸性提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議取約 0.1mL 血清(漿),加入 1mL 酸性提取液),95℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測。NADH 的提取:按照血清(漿)體積(mL):堿性提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議取約 0.1mL血清(漿),加入 1mL 堿性提取液),95℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測。2 組織中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提取:按照組織質量(g):酸性提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議取約 0.1g 組織,加入 1mL酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測。NADH 的提取:按照組織質量(g):堿性提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議取約 0.1g 組織,加入 1mL堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測。3 細胞或細菌中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104 個):酸性提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 酸性提取液),超聲波破碎(冰浴,功率20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次),95℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。NADH 的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104 個):堿性提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 堿性提取液),超聲波破碎(冰浴,功率20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次),95℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。充分混勻,靜置 5min 后,20000g,25℃離心 5min,棄上清,沉淀中加入:混勻,取 200μL 轉移至微量石英比色皿或 96 孔板中,570nm 下讀取對照吸光值 A1 和測定管吸光值 A2,計算△A=A2-A1。注意事項:1、如果一次性測定樣本數較多,可將試劑一、二、三和四按比例配成混合液。2、對照管和測定管的測定步驟的區別:對照管加完試劑一、二、三、四和五后必須馬上加試劑六;測定管加完試劑一、二、三、四和五后必須反應 20min 后再加試劑六。3、反應過程中注意避光。4、若 NAD+測定中△A(A2-A1)≤0.0302,NADH 測定中△A(A2-A1)≤0.0222,說明樣本中輔酶含量較低,已低于檢測限,可做如下調整:(1)將測定管避光靜置時間 20min 延長到 60min;(2)在提取階段增加取樣量,即取 0.2g 樣本或 0.2mL 樣本加入 1mL 提取液。5、由于每一個測定管需要設一個對照管,本試劑盒 100 管保證測 48 個 NAD+或 NADH.NAD+和 NADH 含量的計算:(一) NAD+含量的計算標準條件下的回歸曲線為 y = 0.1475x + 0.0302,R2 = 0.9978;其中 y 為△A,x 為 NAD+濃度 nmol/mL1、血清(漿)中 NAD+含量計算NAD+含量(nmol/mL)=[(△A -0.0302)÷0.1475×V1) ]÷(V3×V1÷V2)=135.6×(△A -0.0302)2、組織、細菌或細胞中 NAD+含量計算(1)按樣本蛋白濃度計算NAD+(nmol/mg prot)=[(△A -0.0302)÷0.1475×V1)]÷(V1×Cpr)= 6.8×(△A -0.0302)÷Cpr(2)按樣本鮮重計算NAD+(nmol/g 鮮重)= [(△A -0.0302)÷0.1475×V1)]÷(W×V1÷V2)= 13.6×(△A -0.0302)÷W(3)按細菌或細胞密度計算NAD+(nmol/104 cell)=[(△A -0.0302)÷0.1475×V1)]÷(500×V1÷V2)=0.027×(△A -0.0302)(二)NADH 含量的計算標準條件下的回歸曲線為 y = 0.1404x + 0.0222,R2 = 0.9976;其中 y 為△A,x 為 NADH 濃度 nmol/mL1、血清(漿)中 NADH 含量計算NADH 含量(nmol/mL)= [ (△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(V3×V1÷V2)= 142.5×(△A -0.0222)2、組織、細菌或細胞中 NADH 含量計算(1)按樣本蛋白濃度計算NADH (nmol/mg prot)= [ (△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(V1×Cpr)= 7.1×(△A -0.0222)÷Cpr(2)按樣本鮮重計算NADH (nmol/g 鮮重)=[(△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(W×V1÷V2)= 14.2×(△A -0.0222)÷W(3)按細菌或細胞密度計算NADH (nmol/104 cell)= [ (△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(500×V1÷V2)=0.028×(△A -0.0222)V1:加入反應體系中樣本體積,0.02mL;V2:加入提取液體積,2mL;V3:加入血清(漿)體積:0.1mL;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL; W:樣本質量,g;500:細胞或細菌總數,500 萬。注 意: 檢測限為 0.1nmol/mL 或 0.1nmol/g 鮮重 或 0.001nmol/mg prot?輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒? ?生化試劑盒可以檢測的樣本類型有哪些?生化試劑盒的實驗原理是基于化學反應,理論上是不受生物種屬及樣本類型的限制。生化試劑盒樣本檢測通常只分樣本類型,不分種屬。但是某些指標在不同種屬或類型樣本中的提取方式不同。因此,具體情況請參見說明書或與技術支持聯系確認。生化試劑盒樣本檢測的一般要求:1)于生化檢測而言,樣本無溶血、脂血、的現象。組織樣本需將血液洗凈擦干后再進行稱重處理。2)樣本處理后盡快進行檢測,且保存于冰盒之上,待測。求3)樣本需澄清,若不澄清,需離心后取上清進行檢測(特殊指標除外)。4)樣本值應在試劑盒線性范圍內,若超過線性范圍,需稀釋后再進行檢測,若低于檢測范圍,需增加樣本濃度后進行檢測。微量法和分光光度法的區別?分光光度法:主流測定體系為1mL,測試儀器分光光度計,能夠大限度地滿足絕大多數用戶的需要。微量法:主流測定體系為0.2mL,測試儀器或分光光度計,測定更加簡便快捷。試劑盒規格中是100管和50管是什么意思?(1)50管/48樣:50管指能夠做50次測定,48樣指可以測試48個樣品。如果每個樣品重復測定3次,那么只能測定16個樣品。其中有2次測定用于空白管或者對照管。值得特別注意的是,50管/24樣中由于每個樣品測定都需要做對照,因此能夠測定樣品的數量僅為8個(假設做3次重復)(2)100管/96樣:100管指能夠做100次測定,96樣指可以測定96個樣品,如果每個樣品重復測定3次,那么只能測定32個樣品。其中有4次測定用于空白管或者對照管。注意由于瓶璧和移液器吸附等,通常要比理論測定次數少1~3次。其它規格的含義依次類推。值得特別注意的是,100管/48樣中由于每個樣品測定都需要做對照,因此能夠測定樣品的數量僅為16個(假設做3次重復)。如何防止試劑盒失效?不要過早訂購,以免試劑盒失效.收到試劑盒后,檢查外包裝是否正常。馬上打開,按照試劑盒說明書核對試劑數量是否正確,注意瓶中試劑狀態是否與說明書一致。如果有問題,或者懷疑,馬上聯系公司銷售,進行確認。如果沒有問題,請務必按照說明書進行試劑的保存。注意,不同試劑,可能需要分別保存在常溫(25°℃)、4℃和-20℃,務必分別按照要求保存,不要整個試劑盒放置于冰箱。如何進行預測定?(1)務必在7個工作日內進行預測定,以確定該試劑盒是否適合您的樣品,以免造成試劑盒和樣品的浪費。(2)選擇2~3個預期差異比較大的樣品,嚴格按照說明書進行操作,注意儀器工作狀態,操作規范,控制好測定條件,尤其是溫度。(3)如實與公司銷售溝通預測定結果,公司技術人員會確認測定結果是否正常,是否需要調整,如何進行調整,從而確保您的測定結果可靠。比色皿有哪些規格?(1)常量比色皿,如1mL和3mL等,常量法試劑盒都是選用1mL體系,只能用1mL比色皿,不可以用更大體積的比色皿,否則試劑量不夠,無法正常比色。(2)微量比色皿,如0.25mL和0.5mL等,微量法試劑盒都是選用0.25mL比色皿。一般客戶都選擇使用標儀(需要自備酶標板)(3)紫外波長檢測需要石英比色皿,不可以用普通玻璃比色皿。(4)不同規格的比色皿,其外觀大小是一致的,都是1cm光徑(也有0.5cm光徑的比色皿,不常見,也可以用,但是計算時要注意修改計算公式),其內容積差異在于壁的厚度。代測的優點(1)更加省事兒,完全不必為測定犯難。用戶只要提供樣品和想測定的指標,就不再需要為測定操心了,不再受到操作技能、儀器設備和時間的限制,就等著拿到數據寫論文。(2)測定數據更有保障。我們經過長期努力,建立了擁有豐富測定經驗的測定團隊、以進口儀器設備為主的測定平臺(尤其是自動勻漿機和自動進樣器)和自己研發和生產的試劑盒,嚴格的測定質量管理體系,從而保證了測定結果的真實可靠。我們還建立了免費預測定制度。即先對用戶樣品進行預測定,并且與用戶就預測定結果進行充分溝通,在預測定結果得到用戶認可的情況下,才與用戶簽訂代測合同。(3)防止樣品損失無論是用戶自己完成測定全過程,還是購買試劑盒完成測定,都可能因為缺乏測定經驗,導致測定失敗,從而損失樣品的情況。對于生命科學研究而言,樣品是*珍貴的。樣品一旦損失,輕則造成研究進度被耽擱,重則造成研究完全失敗!代測能夠充分保證測定成功,從而防止了樣品損失。當然,樣品質量是測定成功的前提,而且樣品質量只有用戶自己才能控制和保證。生化檢測試劑盒的基本原理生化檢測試劑盒,又稱生化試劑盒,是利用特定的生物成分、動力學及化學反應等技術制備的試劑盒,用于檢測生理學、病理學、藥理學等領域中特定的生物分子或化學物質。生化檢測試劑盒包括底物、酶試劑盒、探針等多個組成部分,其中*常用的是底物-酶法。底物-酶法是生化檢測試劑盒檢測的基本原理。在該過程中,底物與酶在細胞膜上結合形成基質酶,進而形成底物-酶復合物。隨著時間的推移,底物-酶復合物逐漸分解,釋放出分子小的底物和分子大的未完全消化的底物。未完全消化的底物可以被一系列的酶代謝,同時底物、酶和代謝產物都會對復合物的穩定性產生影響,從而影響檢測試劑盒的檢測結果。生化試劑盒可以檢測的樣本類型有哪些?生化試劑盒的實驗原理是基于化學反應,理論上是不受生物種屬及樣本類型的限制。生化試劑盒樣本檢測通常只分樣本類型,不分種屬。但是某些指標在不同種屬或類型樣本中的提取方式不同。因此,具體情況請參見說明書或與技術支持聯系確認。生化試劑盒樣本檢測的一般要求:1)于生化檢測而言,樣本*-好無溶血、脂血、黃-疸的現象。組織樣本需將血液洗凈擦干后再進行稱重處理。2)樣本處理后*-好盡快進行檢測,且保存于冰盒之上,待測。3)樣本需澄清,若不澄清,需離心后取上清進行檢測(特殊指標除外)。4)樣本值應在試劑盒線性范圍內,若超過線性范圍,需稀釋后再進行檢測,若低于檢測范圍,需增加樣本濃度后進行檢測。
驢血漿(去紅細胞、無菌過濾)使用方法根據具體實驗來使用。商品簡介 驢血清是通過無菌采集驢血,凝固離心后獲得驢血清。注意事項1、注意無菌操作,避免反復凍融。2、反復凍融可能產生沉淀,可以通過無菌條件下,3500 rpm離心10 min除去沉淀。 驢血清采用成年健康驢血液為原料加工而成,經無菌采集、分離、微孔過濾分裝而成。無支原體、無噬菌體,內毒素含量低于50EU/ml。 驢血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度、酸堿度、滲透壓等作用。它主要由水和各種化學成分組成,這些化學成分包括白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,總膽固醇,谷丙轉氨酶等。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。概述 驢血清指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿,用于科研、診斷試劑生產等。驢血清的作用是提供基本營養物質、提供激素和各種生長因子、提供結合蛋白、提供促接觸。血清應保存在-5℃至-20℃,若存放于4C時勿超過一個月,若一次無法用完一瓶,將無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。背景 血清,指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營養物質、提供激素和各種生長因子、提供結合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養中的細胞起到某些保護作用性質驢血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。作用 血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度、酸堿度、滲透壓等作用。它主要由水和各種化學成分組成,這些化學成分包括白蛋白、α1、Chemicalbookα2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,總膽固醇,谷丙轉氨酶等。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。儲存條件 需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月.由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發生污染或玻璃瓶凍裂.應用 驢血清是細胞培養中用量很大的天然培養基,含有豐富的細胞生長必須的營養成份,常用于動物細胞的體外培養,具有極為重要的功能。提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調變它們所結合的物質活力。有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用。是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。起酸堿度緩沖液作用。提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。驢血漿(去紅細胞、無菌過濾)主要成分血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度、酸堿度、滲透壓等作用。它主要由水和各種化學成分組成,這些化學成分包括白蛋白,α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,總膽固醇,谷丙轉氨酶等。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。對血清的成分和作用的研究雖有很大進展,但仍存在一些問題。主要是:第一:血清的成份可能有幾百種之多,對其準確的成份、含量及其作用機制仍不清楚,尤其是對其中一些多肽類生長因子、激素和脂類等尚未充分認識,這給研究工作帶來許多困難;第二:血清都是批量生產,各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實驗的標準化和連續性受到限制;第三:不能排除血清中含有易變物質,這被認為是“瓶中惡化”的原因之一。血清主要作用●提供基本營養物質:氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質。●提供激素和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質激素(氫化可的松、地塞米松)、類固醇激素(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。●提供結合蛋白:結合蛋白作用是攜帶重要的低分子量物質,如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等,轉鐵蛋白攜帶鐵。結合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。●提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。●對培養中的細胞起到某些保護作用:有一些細胞,如內皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶驢血清的應用驢血清可用于研究驢血清白蛋白的提取及生物活性研究: 在源于驢血清白蛋白的肽HP-6對造血系統的體內外作用研究中分離培養人骨髓有核細胞(human bone marrow nucleated cells,hBMNCs)及小鼠骨髓基質細胞(murinebone marrow stromal cells,mBMSCs),通過與不同濃度肽HP-6(0.000 15,0.001 5,0.015,0.15,1.5μmol.L-1)共培養一定時間考察肽HP-6對骨髓造血相關細胞的促增殖能力,并通過電鏡觀察作用后的細胞形態;建立失血性貧血與環磷酰胺致貧血2種貧血動物模型,隨機分組并灌胃不同劑量(1,0.1,0.01 mg.kg-1)肽HP-6,同時設立相應的對照組灌胃等體積PBS,7 d后檢測貧血動物外周血象,對環磷酰胺致貧血小鼠加測骨髓細胞(bone marrow cells,BMCs)數。結果: 肽HP-6可刺激人骨髓有核細胞和小鼠骨髓基質細胞增殖且具有濃度相關性,0.15μmol.L-1肽HP-6使2種細胞均達到增殖率,分別為152.11%,63.52%,之后呈降低趨勢;電鏡結果顯示與肽HP-6作用后的細胞微觀形態結構正常;灌胃1 mg.kg-1肽HP-6對提高外周血血小板數量及保護環磷酰胺損傷的小鼠骨髓具有一定的功效;灌胃0.1 mg.kg-1肽HP-6對提高外周血白細胞及紅細胞數量有較好的效果,還可對化療藥物作用后小鼠的外周血起到一定的保護作用;灌胃0.01 mg.kg-1肽HP-6對提高外周血血小板數量具有**的效果,相對增殖率可達77.65%。結論:肽HP-6可刺激造血系統相關細胞增殖,對小鼠造血功能與抵抗化療藥物損傷有一定的增強作用。
豬血漿(去紅細胞、無菌過濾)規格:500ml/瓶保質期: 五年如何解凍血清才不會使產品質量受損? 將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規則地搖晃均勻。1.實驗時根據試驗的情況和性質進行必要的防護。根據試驗可能發生的危險事故佩戴必要的防護工具,例如穿好試驗服,戴橡膠手套,防護面具,防毒面具等。實驗前,要注意清理試驗場周圍的安全隱患。檢查試驗裝置、藥品和相關物品是否有不符合要求的情況等。 2.遵循化學藥品的性質和化學反應的規律,不盲目蠻干和主觀臆測化學反應的過程。應根據化學反應的性質和過程選擇匹配的反應裝置,不可圖省事省去必要的安全措施。 實驗事故雖不可預測,但其危險性的大小是可以估計到的。保存方法:(1)長期保存的血清必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發生污染或玻璃瓶凍裂。 (2)一般 提供的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發現血清有懸浮物,則可將血清加入培養液內一起過濾,切勿直接過濾血清。(3)血清解凍: 瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發生。切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝集而出現沉淀。血清的保留應當留意以下幾點:1需求長時間保存的血清有必要儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時間切勿超越1個月.因為血清結冰時體積會添加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,有必要預留必定體積空間,否則易發生污染或玻璃瓶凍裂.2.熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已完全凍住的血清.加熱過程中須規矩搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活.除非有必要,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會構成血清堆積物明顯增多,而且還會影響血清的質量.補體參與反響有:細胞毒作用, 滑潤肌細胞縮短, 肥大細胞和血小板開釋組胺, 增強吞噬作用, 推動和發生化學趨化和活化.3.瓶裝血清凍住需選用逐步凍住法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷悄悄搖晃均勻(當心勿構成氣泡),使溫度與成分均一,削減堆積的發生.切勿直接將血清從-20℃進入37℃凍住,這么因溫度改動太大,簡略構成蛋白質凝集而出現堆積.4.一般 供應的血清為無菌,無需再過濾除菌.如發現血清有懸浮物,則可將血清參加培養液內一同過濾,切勿直接過濾血清.5.血清中的堆積物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及凍住后血清中纖維蛋白構成,這些絮狀物不會影響血清本身的質量.可用離心3000rpm, 5分鐘去掉,也可不用處理. 顯微鏡下"小黑點":通過熱處理過的血清,堆積物的構成會明顯增多.有些堆積物在顯微鏡下查詢象"小黑點",常誤認為血清受污染.一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但假如懷疑血清質量,則應當即停止使用,替換另一批號的血清.6.切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,一同血清中的有效成分會破會而影響血清質量背景豬血清系采用成年健康豬血液為原料加工而成,經無菌采集、分離、微孔過濾分裝而成。無支原體、無噬菌體,內毒素含量低于50EU/ml。豬血清(無菌過濾)在細胞培養中的作用:1.提供基本營養物質:氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質。2.提供激素和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質激素(地塞米松)、類固醇激素(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。3.提供結合蛋白:結合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質,如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等,轉鐵蛋白攜帶鐵。結合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。4.對培養中的細胞起到某些保護作用:有一些細胞,如內皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發現的,現在則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經被廣泛用于貼壁細胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護細胞免受機械損傷,特別是在懸浮培養攪拌時,粘度起到重要作用。血清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝解毒中起重要作用,如SeO3,硒等。豬血漿(去紅細胞、無菌過濾)使用注意事項1.血清解凍采用逐步解凍法(-20℃→2—8℃→25℃或37℃),解凍過程中必須隨時輕搖,使血清受熱溫度均勻。2. 血清凝絮物,血清解凍后會出現少量片狀或絮狀物析出,這主要是由于血清內不穩定蛋白變性、纖維蛋白析出形成沉淀物,實驗證明沉淀物不會影響血清本身質量。;3. 熱滅活本產品除注明外均未滅活。如果必須滅活,請嚴格按照56℃30分鐘(水浴)處理已解凍血清。4. 常溫狀態下短期融化并不會影響血清質量。5.產品有效期,檢定合格之日起有效期5年。解凍血清:將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規則地搖晃均勻。二、保存血清:血清應保存在-5℃至-2O℃若存放于4℃時,請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶,建議將無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。豬血清(無菌過濾)注意事項:(1)有少量蛋白質結塊析出不影響使用。未融化或融化未經搖勻的血清禁止直接放入高溫水浴內加溫。減少血清重復凍融。若您一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。(2)長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發生污染或玻璃瓶凍裂。(3)一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發現血清有懸浮物,則可將血清加入培養液內一起過濾,切勿直接過濾血清。介紹 疫苗在預防豬常見傳染病方面起著非常重要的作用。 它包括豬瘟疫苗、豬肺炎支原體疫苗以及正處在研發熱點中的非洲豬瘟等疫苗。 在豬病毒疫苗和肺炎支原體疫苗生產中,血清是常見的生產細胞用的培養液成分。 尤其是豬血清,常用于豬肺炎支原體疫苗的生產。在對細胞和活疫苗進行支原體檢驗中,《獸藥典》也明確推薦了豬血清作為支原體檢驗用液體培養基的組成成分。并且,《獸藥典》指出在【豬支原體肺炎微量間接血凝試驗】和【豬支氣管敗血波氏桿菌凝集試驗】中需要陰性血清,即正常豬血清。 在豬瘟疫苗等其他豬病毒疫苗的生產中,常用豬腎細胞(PK-15)或豬睪丸細胞(ST)進行病毒的繁殖。其培養液除添加MEM外,常添加新生牛血清。但從品系相同的角度來看,豬血清更為合適。 實際上早在1989年,國外就建議用豬血清取代牛血清,用于培養制造非洲豬瘟病毒的細胞(見《動物檢疫》 1991年01期《豬血清中的牛血清白蛋白抗體引起非洲豬瘟血清學診斷的假陽性反應》),原因是牛血清中的白蛋白會干擾非洲豬瘟抗體的檢測,造成假陽性反應。
豚鼠血漿(去紅細胞、無菌過濾)血清使用注意事項:防止發病免疫血清多用馬、牛血液制備,馬、牛血清對其它動物來說,也具有抗原性,有引起血清病的可能,因此,使用免疫血清要注意防止引起血清病,預防的主要措施是使用提純的制品,不用不合格的產品;另外,不要有急功近利的想法,要按照要求劑量使用,一次用量不可過大。大鼠小鼠取血操作步驟:1.剪尾采血 小鼠每次采血量0.1ml,大鼠每次采血量0.3-0.5ml左手拇指和食指從背部捉住鼠頸部皮膚,將鼠頭朝下,鼠保定后將其尾巴置于50℃熱水中浸泡數分鐘,使尾部血管充盈。擦干尾部,再用剪刀或刀片剪去尾尖1-2mm,用試管接流出的血液,同時自尾根部向尾尖按-摩。取血后用棉球壓榨止血并用6%液體火棉膠涂在傷口處止血。 2.去除眼球采血小鼠采血量0.5-1ml左手捉住小鼠頸部皮膚,輕壓在實驗臺上,取側臥位,左手食指盡量將小鼠眼周皮膚往頸后壓,使眼球杰出。用眼科彎鑷迅速夾去眼球,將鼠倒立,用器皿接住流出的血液。采血完畢立即用紗布壓榨止血。大鼠少用。 3.心臟采血小鼠采血量0.5-0.6ml,大鼠采血量1-1.5ml鼠仰臥位固定,剪去胸前區被毛,皮膚消毒后,用左手食指在左側第3-4肋間觸摸到心搏處,右手持帶有4-5號針頭的注射器,選擇心搏zui強處穿刺,當刺中心臟時,血液會主動進入注射器。 4.斷頭采血小鼠采血0.8-1.2ml,大鼠采血量5-10ml左手拇指和食指從背部捉住鼠頸部皮膚,將鼠頭朝下,右手用剪刀剪斷鼠頸部約1/2-4/5,讓血液流入試管。 5.眼眶靜脈叢采血小鼠采血量為0.2-0.4ml,大鼠采血量為0.4-0.8ml取內徑為1.0-1.5mm的玻璃毛細管,臨用前折斷成1~1.5cm長的毛細管段,浸入1%肝素溶液中,干燥后用。取血時左手捉住鼠兩耳之間的頸背部皮膚以固定頭部,悄悄向下壓榨頸部兩邊,引起頭部靜脈血液回流困難使眼眶靜脈叢充血,右手持毛細管由內眥部刺進結膜,再悄悄向眼底部方向推進,悄悄旋轉毛細管以劃破靜脈叢,讓血液順毛細管流出,接收入事前準備的容器中。采血后紗布輕壓眼部止血。小鼠、大鼠、豚鼠及家兔均可采納此法取血。刺入深度小鼠為2-3mm,可采血0.2-0.3ml;大鼠為4-5mm,可采血0.4-0.8ml。豚鼠血漿(去紅細胞、無菌過濾)Tips:1. 血清的保存:在-15℃以下血清的有效期為5年,4℃可保存數周,不宜室溫保存,不宜反復凍融。配制成完全培養基后應在四周內用完,一瓶血清如無法一次用完應無菌分裝成恰當數量并冷凍保存。2、血清中的絮狀沉淀物:血清是多種蛋白質的混合物,在凍融過程中會出現絮狀沉淀物,主要原因是由于血清中脂蛋白和纖維蛋白變性所造成。但并不影響血清本身的質量和使用。如需去除可先400g離心取上清液配制成完全培養基再過濾即可使用。3、血清的解凍:合理的解凍方式可以更好的保護血清質量并可以在*大程度上減少絮狀沉淀物的產生。血清從低溫冰箱中取出后,經4℃冰箱、室溫、37℃水浴逐步規則搖晃均勻融解,直至完全融解后再使用。4、血清的熱滅活:將血清嚴格56℃水浴均勻加溫30分鐘可以滅活血清中的補體系統。是不是所有用途的血清都需要熱滅活呢?對大多數細胞來說是不需要的。激活的補體能參與溶解細胞,刺激光滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞。因此在免疫學研究,培養ES細胞,昆蟲細胞和平滑肌肉細胞時,建議使用熱滅活血清,在正常情況下加熱處理對血清的促細胞生長效應無明顯促進作用,甚至會因為加熱處理影響血清的質量。5、血清中的“小黑點”現象:血清在經過一段時間的低溫凍存再融解后,在正常情況下會出現絮狀蛋白沉淀。但往往有用戶反應血清中有“小黑點”現象,認為是微生物污染。實驗發現血清在37℃環境放置時間過長或經過加熱滅活處理,血清中的沉淀物往往會呈增多趨勢,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,讓使用者誤以為是血清遭受微生物污染并在分裂增殖。因此如無必要,完全可以不進行熱滅活處理并保證血清的低溫保存。實驗證明使用血清時注意以下幾點事項不但可以保證血清質量并能給使用者帶來方便:◎血清可在-15℃以下低溫保存。◎血清一瓶血清一次無法用完的應分裝凍存,分次用完。◎血清按-15℃以下至4℃至室溫至37℃逐步均勻解凍使用。◎若非必要,無須進行熱滅活。若必須做血清熱滅活的,須嚴格控制在56℃水浴30分鐘均勻加熱滅活。血清的定義血清指血漿除去纖維蛋白原后的膠狀液體。每100ml人血清含有蛋白質6-8g,其中主要是白蛋白和球蛋白。血清不會凝固。有免疫,維持酸堿平衡和滲透壓的作用,血清蛋白質亦可儲備供給機體蛋白質不足時的應用。人和動物的血清常用以進行各種血清學試驗,幫助診斷疾病。含抗體的血清可作為預防或治療疾病之用 血清的主要成分血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度、酸堿度、滲透壓等作用。它主要由水和各種化學成分組成,這些化學成分包括白蛋白,α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,總膽固醇,谷丙轉氨酶等。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。對血清的成分和作用的研究雖有很大進展,但仍存在一些問題。主要是:第一:血清的成份可能有幾百種之多,對其準確的成份、含量及其作用機制仍不清楚,尤其是對其中一些多肽類生長因子、激素和脂類等尚未充分認識,這給研究工作帶來許多困難;第二:血清都是批量生產,各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實驗的標準化和連續性受到限制;第三:不能排除血清中含有易變物質,這被認為是“瓶中惡化”的原因之一
小鼠血漿(去紅細胞、無菌過濾)血清使用注意事項:防止發病免疫血清多用馬、牛血液制備,馬、牛血清對其它動物來說,也具有抗原性,有引起血清病的可能,因此,使用免疫血清要注意防止引起血清病,預防的主要措施是使用提純的制品,不用不合格的產品;另外,不要有急功近利的想法,要按照要求劑量使用,一次用量不可過大。大鼠小鼠取血操作步驟:1.剪尾采血 小鼠每次采血量0.1ml,大鼠每次采血量0.3-0.5ml左手拇指和食指從背部捉住鼠頸部皮膚,將鼠頭朝下,鼠保定后將其尾巴置于50℃熱水中浸泡數分鐘,使尾部血管充盈。擦干尾部,再用剪刀或刀片剪去尾尖1-2mm,用試管接流出的血液,同時自尾根部向尾尖按-摩。取血后用棉球壓榨止血并用6%液體火棉膠涂在傷口處止血。 2.去除眼球采血小鼠采血量0.5-1ml左手捉住小鼠頸部皮膚,輕壓在實驗臺上,取側臥位,左手食指盡量將小鼠眼周皮膚往頸后壓,使眼球杰出。用眼科彎鑷迅速夾去眼球,將鼠倒立,用器皿接住流出的血液。采血完畢立即用紗布壓榨止血。大鼠少用。 3.心臟采血小鼠采血量0.5-0.6ml,大鼠采血量1-1.5ml鼠仰臥位固定,剪去胸前區被毛,皮膚消毒后,用左手食指在左側第3-4肋間觸摸到心搏處,右手持帶有4-5號針頭的注射器,選擇心搏zui強處穿刺,當刺中心臟時,血液會主動進入注射器。 4.斷頭采血小鼠采血0.8-1.2ml,大鼠采血量5-10ml左手拇指和食指從背部捉住鼠頸部皮膚,將鼠頭朝下,右手用剪刀剪斷鼠頸部約1/2-4/5,讓血液流入試管。 5.眼眶靜脈叢采血小鼠采血量為0.2-0.4ml,大鼠采血量為0.4-0.8ml取內徑為1.0-1.5mm的玻璃毛細管,臨用前折斷成1~1.5cm長的毛細管段,浸入1%肝素溶液中,干燥后用。取血時左手捉住鼠兩耳之間的頸背部皮膚以固定頭部,悄悄向下壓榨頸部兩邊,引起頭部靜脈血液回流困難使眼眶靜脈叢充血,右手持毛細管由內眥部刺進結膜,再悄悄向眼底部方向推進,悄悄旋轉毛細管以劃破靜脈叢,讓血液順毛細管流出,接收入事前準備的容器中。采血后紗布輕壓眼部止血。小鼠、大鼠、豚鼠及家兔均可采納此法取血。刺入深度小鼠為2-3mm,可采血0.2-0.3ml;大鼠為4-5mm,可采血0.4-0.8ml。Tips:1. 血清的保存:在-15℃以下血清的有效期為5年,4℃可保存數周,不宜室溫保存,不宜反復凍融。配制成完全培養基后應在四周內用完,一瓶血清如無法一次用完應無菌分裝成恰當數量并冷凍保存。2、血清中的絮狀沉淀物:血清是多種蛋白質的混合物,在凍融過程中會出現絮狀沉淀物,主要原因是由于血清中脂蛋白和纖維蛋白變性所造成。但并不影響血清本身的質量和使用。如需去除可先400g離心取上清液配制成完全培養基再過濾即可使用。3、血清的解凍:合理的解凍方式可以更好的保護血清質量并可以在*大程度上減少絮狀沉淀物的產生。血清從低溫冰箱中取出后,經4℃冰箱、室溫、37℃水浴逐步規則搖晃均勻融解,直至完全融解后再使用。4、血清的熱滅活:將血清嚴格56℃水浴均勻加溫30分鐘可以滅活血清中的補體系統。是不是所有用途的血清都需要熱滅活呢?對大多數細胞來說是不需要的。激活的補體能參與溶解細胞,刺激光滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞。因此在免疫學研究,培養ES細胞,昆蟲細胞和平滑肌肉細胞時,建議使用熱滅活血清,在正常情況下加熱處理對血清的促細胞生長效應無明顯促進作用,甚至會因為加熱處理影響血清的質量。5、血清中的“小黑點”現象:血清在經過一段時間的低溫凍存再融解后,在正常情況下會出現絮狀蛋白沉淀。但往往有用戶反應血清中有“小黑點”現象,認為是微生物污染。實驗發現血清在37℃環境放置時間過長或經過加熱滅活處理,血清中的沉淀物往往會呈增多趨勢,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,讓使用者誤以為是血清遭受微生物污染并在分裂增殖。因此如無必要,完全可以不進行熱滅活處理并保證血清的低溫保存。小鼠血漿(去紅細胞、無菌過濾)實驗證明使用血清時注意以下幾點事項不但可以保證血清質量并能給使用者帶來方便:◎血清可在-15℃以下低溫保存。◎血清一瓶血清一次無法用完的應分裝凍存,分次用完。◎血清按-15℃以下至4℃至室溫至37℃逐步均勻解凍使用。◎若非必要,無須進行熱滅活。若必須做血清熱滅活的,須嚴格控制在56℃水浴30分鐘均勻加熱滅活。血清的定義血清指血漿除去纖維蛋白原后的膠狀液體。每100ml人血清含有蛋白質6-8g,其中主要是白蛋白和球蛋白。血清不會凝固。有免疫,維持酸堿平衡和滲透壓的作用,血清蛋白質亦可儲備供給機體蛋白質不足時的應用。人和動物的血清常用以進行各種血清學試驗,幫助診斷疾病。含抗體的血清可作為預防或治療疾病之用 血清的主要成分血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度、酸堿度、滲透壓等作用。它主要由水和各種化學成分組成,這些化學成分包括白蛋白,α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,總膽固醇,谷丙轉氨酶等。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。對血清的成分和作用的研究雖有很大進展,但仍存在一些問題。主要是:第一:血清的成份可能有幾百種之多,對其準確的成份、含量及其作用機制仍不清楚,尤其是對其中一些多肽類生長因子、激素和脂類等尚未充分認識,這給研究工作帶來許多困難;第二:血清都是批量生產,各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實驗的標準化和連續性受到限制;第三:不能排除血清中含有易變物質,這被認為是“瓶中惡化”的原因之一
大鼠血漿(去紅細胞、無菌過濾)血清使用注意事項:防止發病免疫血清多用馬、牛血液制備,馬、牛血清對其它動物來說,也具有抗原性,有引起血清病的可能,因此,使用免疫血清要注意防止引起血清病,預防的主要措施是使用提純的制品,不用不合格的產品;另外,不要有急功近利的想法,要按照要求劑量使用,一次用量不可過大。大鼠小鼠取血操作步驟:1.剪尾采血 小鼠每次采血量0.1ml,大鼠每次采血量0.3-0.5ml左手拇指和食指從背部捉住鼠頸部皮膚,將鼠頭朝下,鼠保定后將其尾巴置于50℃熱水中浸泡數分鐘,使尾部血管充盈。擦干尾部,再用剪刀或刀片剪去尾尖1-2mm,用試管接流出的血液,同時自尾根部向尾尖按-摩。取血后用棉球壓榨止血并用6%液體火棉膠涂在傷口處止血。 2.去除眼球采血小鼠采血量0.5-1ml左手捉住小鼠頸部皮膚,輕壓在實驗臺上,取側臥位,左手食指盡量將小鼠眼周皮膚往頸后壓,使眼球杰出。用眼科彎鑷迅速夾去眼球,將鼠倒立,用器皿接住流出的血液。采血完畢立即用紗布壓榨止血。大鼠少用。 3.心臟采血小鼠采血量0.5-0.6ml,大鼠采血量1-1.5ml鼠仰臥位固定,剪去胸前區被毛,皮膚消毒后,用左手食指在左側第3-4肋間觸摸到心搏處,右手持帶有4-5號針頭的注射器,選擇心搏zui強處穿刺,當刺中心臟時,血液會主動進入注射器。 4.斷頭采血小鼠采血0.8-1.2ml,大鼠采血量5-10ml左手拇指和食指從背部捉住鼠頸部皮膚,將鼠頭朝下,右手用剪刀剪斷鼠頸部約1/2-4/5,讓血液流入試管。 5.眼眶靜脈叢采血小鼠采血量為0.2-0.4ml,大鼠采血量為0.4-0.8ml取內徑為1.0-1.5mm的玻璃毛細管,臨用前折斷成1~1.5cm長的毛細管段,浸入1%肝素溶液中,干燥后用。取血時左手捉住鼠兩耳之間的頸背部皮膚以固定頭部,悄悄向下壓榨頸部兩邊,引起頭部靜脈血液回流困難使眼眶靜脈叢充血,右手持毛細管由內眥部刺進結膜,再悄悄向眼底部方向推進,悄悄旋轉毛細管以劃破靜脈叢,讓血液順毛細管流出,接收入事前準備的容器中。采血后紗布輕壓眼部止血。小鼠、大鼠、豚鼠及家兔均可采納此法取血。刺入深度小鼠為2-3mm,可采血0.2-0.3ml;大鼠為4-5mm,可采血0.4-0.8ml。大鼠血漿(去紅細胞、無菌過濾)Tips:1. 血清的保存:在-15℃以下血清的有效期為5年,4℃可保存數周,不宜室溫保存,不宜反復凍融。配制成完全培養基后應在四周內用完,一瓶血清如無法一次用完應無菌分裝成恰當數量并冷凍保存。2、血清中的絮狀沉淀物:血清是多種蛋白質的混合物,在凍融過程中會出現絮狀沉淀物,主要原因是由于血清中脂蛋白和纖維蛋白變性所造成。但并不影響血清本身的質量和使用。如需去除可先400g離心取上清液配制成完全培養基再過濾即可使用。3、血清的解凍:合理的解凍方式可以更好的保護血清質量并可以在*大程度上減少絮狀沉淀物的產生。血清從低溫冰箱中取出后,經4℃冰箱、室溫、37℃水浴逐步規則搖晃均勻融解,直至完全融解后再使用。4、血清的熱滅活:將血清嚴格56℃水浴均勻加溫30分鐘可以滅活血清中的補體系統。是不是所有用途的血清都需要熱滅活呢?對大多數細胞來說是不需要的。激活的補體能參與溶解細胞,刺激光滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞。因此在免疫學研究,培養ES細胞,昆蟲細胞和平滑肌肉細胞時,建議使用熱滅活血清,在正常情況下加熱處理對血清的促細胞生長效應無明顯促進作用,甚至會因為加熱處理影響血清的質量。5、血清中的“小黑點”現象:血清在經過一段時間的低溫凍存再融解后,在正常情況下會出現絮狀蛋白沉淀。但往往有用戶反應血清中有“小黑點”現象,認為是微生物污染。實驗發現血清在37℃環境放置時間過長或經過加熱滅活處理,血清中的沉淀物往往會呈增多趨勢,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,讓使用者誤以為是血清遭受微生物污染并在分裂增殖。因此如無必要,完全可以不進行熱滅活處理并保證血清的低溫保存。實驗證明使用血清時注意以下幾點事項不但可以保證血清質量并能給使用者帶來方便:◎血清可在-15℃以下低溫保存。◎血清一瓶血清一次無法用完的應分裝凍存,分次用完。◎血清按-15℃以下至4℃至室溫至37℃逐步均勻解凍使用。◎若非必要,無須進行熱滅活。若必須做血清熱滅活的,須嚴格控制在56℃水浴30分鐘均勻加熱滅活。血清的定義血清指血漿除去纖維蛋白原后的膠狀液體。每100ml人血清含有蛋白質6-8g,其中主要是白蛋白和球蛋白。血清不會凝固。有免疫,維持酸堿平衡和滲透壓的作用,血清蛋白質亦可儲備供給機體蛋白質不足時的應用。人和動物的血清常用以進行各種血清學試驗,幫助診斷疾病。含抗體的血清可作為預防或治療疾病之用 血清的主要成分血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度、酸堿度、滲透壓等作用。它主要由水和各種化學成分組成,這些化學成分包括白蛋白,α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,總膽固醇,谷丙轉氨酶等。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。對血清的成分和作用的研究雖有很大進展,但仍存在一些問題。主要是:第一:血清的成份可能有幾百種之多,對其準確的成份、含量及其作用機制仍不清楚,尤其是對其中一些多肽類生長因子、激素和脂類等尚未充分認識,這給研究工作帶來許多困難;第二:血清都是批量生產,各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實驗的標準化和連續性受到限制;第三:不能排除血清中含有易變物質,這被認為是“瓶中惡化”的原因之一
雞血漿(去紅細胞、無菌過濾)適用范圍【產品名稱】 雞血清(無菌過濾)【產品規格】100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶【產品價格】130元-4500元【適用范圍]適應于細胞培養、免疫檢測等。【儲存條件及有效期]1、密封保存于-10℃~-30℃2、有效期五年[注意事項]1、本產品僅供科研使用。2、產品使用過程中,注意防止污染,在室溫內放置過久會影響使用效果,使用后請盡快放入-10℃~-33、請勿將使用后剩余的試劑再倒入原包裝瓶內。【生產日期]詳見標簽,請在產品標簽標注的有效期內使用。產品介紹 雞血清是細胞培養中的天然培養基,含有豐富的細胞生長必須的營養成份,常用于動物細胞的體外培養,具有極為重要的功能。1.提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。2. 提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調變它們所結合的物質活力。3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到作用。4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。 6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。 雞血清的成分和作用的研究雖有很大進展,但仍存在一些問題。主要是:第一:血清的成份可能有幾百種之多,目前對其準確的成份、含量及其作用機制仍不清楚,尤其是對其中一些多肽類生長因子、激素和脂類等尚未充分認識,這給研究工作帶來許多困難;第二:血清都是批量生產,各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實驗的標準化和連續性受到限制;第三:不能排除血清中含有易變物質,這被認為是“瓶中”的原因之一。 雞血清瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發生.切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝集而出現沉淀.雞血漿(去紅細胞、無菌過濾)雞血清 的其它產品特點:雞血清用于嬌貴細胞培養、細胞株保存特級新生牛血清用于雜交、骨質、原代、傳代細胞等細胞培養及疫苗、診斷試劑生產等馬血清用于科研、診斷試劑生產等山羊血清用于科研、診斷試劑生產等兔血清用于科研等驢血清用于科研、診斷試劑生產等豬血清用于科研、診斷試劑生產等雞血清用于科研、診斷試劑生產等無菌脫纖維綿羊血用于科研、診斷試劑生產等無菌脫纖維兔血用于科研、診斷試劑生產等羊血漿用于科研等兔血漿用于科研等產品應用: 用于雜交瘤細胞、骨質瘤細胞、原代、傳代細胞等細胞培養及疫苗、診斷試劑生產;雞血清IgG的純化及其單抗制備與鑒定: IgG是血清中主要的免疫球蛋白(Ig),占血清Ig總量的75%~80%,它是血液中主要的抗體成分,血清中IgG水平的測定,已是疫苗免疫效果評定和體液免疫研究的常用指標。與常規免疫血清相比,單克隆抗體具有與抗原結合的高特異性,是免疫學和血清學研究的重要工具,在畜牧獸醫的疾病診斷與治療方面已經被廣泛應用。在養禽業中,運用這些單克隆抗體來檢測疫病特異性的抗體,對全面、系統地了解禽的機體對病原體感染的免疫應答反應并采取相應的防制措施有重要意義。雞血清的背景 雞血清是細胞培養中用量的天然培養基,含有豐富的細胞生長必須的營養成份,常用于動物細胞的體外培養,具有極為重要的功能。血清必須貯存于–20~-70 oC,若存放于4度,不能超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45 ml分裝于無菌50 ml離心管中,由于血清結凍時體積會增加約10%,必須預留10%膨脹體積的空間,否則易發生污染或容器凍裂。 瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):從-20 oC或–70 oC取出放至4 oC冰箱溶解一天,再置于室溫下全溶后分裝,一般50 ml無菌離心管可分裝40~45 ml。在溶解過程中須規則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發生。切勿直接由–20 oC直接至37 oC解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發生沈淀。勿將血清置于37 oC太久,若在37 oC放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多不穩定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質。
馬血漿(去紅細胞、無菌過濾)產品介紹 采用健康動物血液為原料,經無菌采集,分離,微孔過濾后而成,性狀為橙清液體,無噬菌體,無溶血,無異物,無細菌,真菌支原體毒形體衣原體等,適應于試驗室或生化科研相關試驗,滿足不同科研實驗的多種需求注意事項1、注意避免反復凍融。反復凍融可能產生沉淀,可以通過無菌條件下,3500 rp m離心10 min除去沉淀。2、注意無菌操作。標簽:馬血清說明書 ;馬血清規格產品用途1、可用于細胞培養或誘導樹突細胞,且細胞生長,增殖狀況良好 有研究人員分別用胎牛血清和馬血清培養馬單核細胞來產生權突狀細胞(eqMoDC),結果發現,馬血清生成的eqMoDC與FBS生成的eqMoDC沒有區別。然而,與馬血清補充培養基一起孵育的e qMo DC在從單核細胞分化過程中表現出更具特征性的樹突狀細胞形態。在用馬血清培養的eqMoDC中也觀察到細胞活力的顯著增加。此外,發現在馬血清存在下產生的eqMoDC在功能性T淋巴細胞啟動能力方面優越,并且引發的非特異性增殖顯著減少。2、可用于原代培養神經細胞 有人用含10%馬血清的DMEM,分離培養BALB/c小鼠原代腦神經細胞。發現和添加2%神經細胞生長劑B27的Neurobasal培養基相比,含10%馬血清的DMEM培養基更節省成本,方便廉價。3、特定脂肪酸產物濃度的馬血清,對造血細胞有支持作用 研究表明,磷脂酶A2特定脂肪酸產物的濃度馬血清,支持多能小鼠造血祖細胞FDCP-Mix細胞自我更新的能力。4、可增強豬單性生殖胚胎植入前,胚層的發育。 有研究通過對比不同血清和血清樣物質,對豬單性生殖胚胎植入前發育的影響,尋找適合其發育的培養基。對單性生殖胚胎進行豬濾泡液(PFF)、胎牛血清((FBS)、馬血清(HS)或豬血清白蛋白(PSA)處理,培養2天后。通過囊胚形成和孵化,發現馬血清是增強胚層發育的*有效蛋白質來源。接下來,使用三種不同濃度的HS (10%,20%和30%)來確定改善豬單性生殖胚胎發育所需的適宜HS濃度。所有HS濃度均增加了囊胚細胞數量,降低了囊胚凋亡細胞的發生率,其中20%效果更顯著。5、馬血清添加到微生物培養基中,可用于培養微生物,如∶(1)馬血清添加到培養基中用于支原體的培養。在《獸藥典》中,含馬血清的支原體培養基被用于獸用疫苗的支原體檢查。用KM2培養基(含馬血清)還可培養豬肺炎支原體。(2)馬血清加入到固體和液體培養基中,可用于培養幽門螺桿菌。并且,和羊血清和牛血清比較,添加馬血清的培養基更易于分裝和保存。馬血漿(去紅細胞、無菌過濾)檢驗報告:檢測項目檢測結果外觀淡黃色液體PH7.26無菌檢驗陰性總蛋白68.6g/L白蛋白35.1g/L支原體陰性內毒素8UE/mL血紅蛋白0.04g/L血清的主要作用●提供基本營養物質:氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質。●提供激素和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質激素(氫化可的松、地塞米松)、類固醇激素(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。●提供結合蛋白:結合蛋白作用是攜帶重要的低分子量物質,如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等,轉鐵蛋白攜帶鐵。結合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。●提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。●對培養中的細胞起到某些保護作用:有一些細胞,如內皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發現的,則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經被廣泛用于貼壁細胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護細胞免受機械損傷,特別是在懸浮培養攪拌時,粘度起到重要作用。血清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝解毒中起重要作用,如SeO3,硒等。鑒別方法 血清血液凝固析出的淡黃色透明液體 。如將血液自血管內抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應被激活,血液迅速凝固,形成膠凍。凝血塊收縮,其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,也可于凝血后經離心取得。在凝血過程中,纖維蛋白原轉變成纖維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,這一點是與血漿*大的區別。而在凝血反應中,血小板釋放出許多物質,各凝血因子也都發生了變化。這些成分都留在血清中并繼續發生變化,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區別之處。但大量未參加凝血反應的物質則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學成分的分析,都以血清為樣品。血漿血漿是血液的液體成分,血細胞懸濁于其中。人體含有2750-3300毫升血漿,約占血液總體積的55%。血漿的絕大部分是水(體積的90%),其中溶解的物質主要是血漿蛋白,還包括葡萄糖、無機鹽離子、激素以及二氧化碳。血漿的主要功能是運載血細胞,同時也是運輸分泌產物的主要媒介。
兔血漿(去紅細胞、無菌過濾)產品描述血清采集自正常健康的供體,經脂質萃取和透析后儲存于緩沖液(0.01 M磷酸鈉,0.25 M氯化鈉, pH 7.6)中。常用于各種免疫實驗,起到封閉或對照的作用。本品用于封閉的常見使用濃度為5%(v/v)。產品使用1)血清是以凍干粉形式提供的,本品需要先溶解配制成100%原液后再稀釋使用。溶解方法:用10ml 蒸餾水(dH2O)充分溶解凍干粉(如果不澄清,可對其離心處理),此時得到的即是100%原液。然后按照1:20的比例用緩沖液,如PBS或PBST,稀釋到需要的5%工作液。也可以根據自身實驗條件,稀釋到合適的工作液濃度。2)血清以100%原液的形式提供,直接用合適的緩沖液稀釋到需要的工作液。產品性質蛋白濃度(Protein concentration)60 mg/mL緩沖液(Buffer)0.01 M磷酸鈉,0.25 M氯化鈉, pH 7.6防腐劑(Preservative)0.05%疊氮化鈉運輸與保存方法冰袋運輸。凍干粉保存于2~8℃。100%原液保存于2~8℃,6個星期穩定。建議原液分裝后置于≤-20℃,以延長保存期。重溶后100%原液的有效期1年。注意事項1)本品含疊氮化鈉,對人體有害,請注意適當防護。2)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。3)注意無菌操作4)注意避免反復凍融。反復凍融可能產生沉淀,可以通過無菌條件下,3500rpm離心10min除去沉淀兔血漿(去紅細胞、無菌過濾)常見問題 保存方法血清應保存在-5℃至-20℃。然而,若存放于4℃時,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,建議將無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。解凍方法將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規則地搖晃均勻。避免產生沉淀物1、解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產生沉淀物。2、解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。3、請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質量。4、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。 [3]5、若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。若血清解凍后發現有絮狀沉淀物出現,可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養基內一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞過濾膜。熱滅活一般是以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清,因為此加熱步驟,可以使補體去活化,而補體所參與的反應有:溶細胞活性,平滑肌的收縮,肥大細胞和血小板組胺的釋放,增強吞噬作用,淋巴細胞、巨噬細胞的趨化和激活。鑒別方法 血清血液凝固析出的淡黃色透明液體 。如將血液自血管內抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應被激活,血液迅速凝固,形成膠凍。凝血塊收縮,其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,也可于凝血后經離心取得。在凝血過程中,纖維蛋白原轉變成纖維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,這一點是與血漿*大的區別。而在凝血反應中,血小板釋放出許多物質,各凝血因子也都發生了變化。這些成分都留在血清中并繼續發生變化,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區別之處。但大量未參加凝血反應的物質則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學成分的分析,都以血清為樣品。血漿血漿是血液的液體成分,血細胞懸濁于其中。人體含有2750-3300毫升血漿,約占血液總體積的55%。血漿的絕大部分是水(體積的90%),其中溶解的物質主要是血漿蛋白,還包括葡萄糖、無機鹽離子、激素以及二氧化碳。血漿的主要功能是運載血細胞,同時也是運輸分泌產物的主要媒介。將新鮮血液離心,使血細胞沉降,上層淡黃色清液即是血漿。血漿與血清的區別是血清中不含纖維蛋白原等凝血因子。