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?ELISA的類型?根據試劑的來源和樣本的情況以及檢測的具體條件，可設計出各種不同類型的檢測方法，按照原理及操作，市面的方法有：?1.間接法ELISA是檢測抗體的方法，原理為利用酶標記的二抗以檢測已與固相結合的受檢抗體，顯色測定。優勢在于待測一抗無需標記快速便捷。直接法ELISA與間接法ELISA相似，區別在于一抗酶標，檢測孵育也以抗原為主，但直接法ELISA的靈敏度有限，需權衡使用。??2.夾心法ELISA又分為雙抗原夾心法和雙抗體夾心法ELISA，原理相似，用于檢測抗體或抗原含量。以雙抗體夾心法為例，捕獲抗體包被在固相載體上，加入抗原或待測樣本結合，后加入的檢測抗體結合在抗原上，形成三明治夾心形式。雙抗夾心法是市面＊常見與方便分析的方法。3.競爭法ELISA小分子抗原與半抗原的檢測方法常用競爭法ELISA，待檢樣本中抗原越多，被結合的酶標抗原的量會減少，彼此形成競爭負相關體系，顯色物質也就越少，根據顯色物質的比例可擬合得到待測抗原含量。?4.其他方法a.免疫抑制法測ELISA：固相包被抗原，被檢樣本對底物顯色的抑制程度與樣本中所含抗原的量成正比，二者之差為待測抗原含量，原理類似與競爭法ELISA。b.阻斷ELISA：目的檢測特異性抗體，也稱為競爭ELISA，原理為固相包被抗原，待測樣本與一抗酶標競爭孵育，待檢樣本中抗體越多，顯色越淺，反則反之。非洲豬瘟病毒抗體檢測試劑盒中涉及該法。c.此外有用于檢測IgM抗體的抗體捕捉ELISA，有固相載體改變的Dot-ELISA（硝酸纖維素膜）和C-ELISA（滌綸布），還有技術分類的TRFIA和多因子檢測等。

分光光度法    分光光度法是通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內光的吸光度或發光強度，對該物質進行定性和定量分析的方法。    在分光光度計中，將不同波長的光連續地照射到一定濃度的樣品溶液時，便可得到與不同波長相對應的吸收強度。如以波長(λ)為橫坐標，吸收強度(A)為縱坐標，就可繪出該物質的吸收光譜曲線。利用該曲線進行物質定性、定量的分析方法，稱為分光光度法，也稱為吸收光譜法。用紫外光源測定無色物質的方法，稱為紫外分光光度法;用可見光光源測定有色物質的方法，稱為可見光光度法。它們與比色法一樣，都以Ｌａｍｂｅｒｔ－Ｂｅｅｒ定律為基礎。 上述的紫外光區與可見光區是常用的。但分光光度法的應用光區包括紫外光區，可見光區，紅光區。紫光分光光度計，可見分光光度計(或比色計)、紅光分光光度計或原子吸收分光光度計。儀器    紫光分光光度計，可見分光光度計(或比色計)、紅光分光光度計或原子吸收分光光度計。為保證測量的精密度和準確度，所有儀器應按照國家計量檢定規程或本附錄規定，定期進行校正檢定。基本原理    當一束強度為I0的單色光垂直照射某物質的溶液后,由于一部分光被體系吸收,因此透射光的強度降至I,則溶液的透光率T為:T=(I0-I)/I0根據朗伯(Lambert)-比爾(Beer)定律:A=abc    式中A為吸光度，b為溶液層厚度(cm)，c為溶液的濃度(g/dm^3)， a為吸光系數。其中吸光系數 與溶液的本性、溫度以及波長等因素有關。溶液中其他組分(如溶劑等)對光的吸收可用空白液扣除。    由上式可知，當溶液層厚度b和吸光系數a固定時，吸光度A與溶液的濃度成線性關系。在定量分析時，首先需要測定溶液對不同波長光的吸收情況(吸收光譜)，從中確定＊大吸收波長 ，然后以此波長 的光為光源，測定一系列已知濃度c溶液的吸光度A，作出A~c工作曲線。在分析未知溶液時，根據測量的吸光度A，查工作曲線即可確定出相應的濃度。這便是分光光度法測量濃度的基本原理。

關于細胞培養培養條件  培養時應根據細菌種類和目的等選擇培養方法、培養基，制定培養條件(溫度、pH值、時間，對氧的需求與否等)。一般操作步驟為先將標本接種于固體培養基上，做分離培養。再進一步對所得單個菌落進行形態、生化及血清學反應鑒定。培養基常用牛肉湯、蛋白胨、氯化鈉、葡萄糖、血液等和某些細菌所需的特殊物質配制成液體、半固體、固體等。一般細菌可在有氧條件下，37℃中放18~24小時生長。厭氧菌則需在無氧環境中放2~3天后生長。個別細菌如結核菌要培養1個月之久。注意點由于細菌無處不在，因此從制備培養基時開始，整個培養過程必須按無菌操作要求進行，否則外界細菌污染標本，會導致錯誤結果;而培養的致病菌一旦污染環境，就會引起交叉感染。以疾病診斷為目的進行的培養，要選擇合適的標本(血、尿、便、膿液、分泌物等)，并應結合臨床情況解釋所得結果。具體培養步驟以光合細菌培養方法為例。光合細菌培養的方法，按次序分為容器、工具的消毒，培養基的制備，接種和培養管理四個步驟。(一)容器、工具的消毒參考、此處從略。(二)培養基的制備1.培養用水如果培養的光合細菌是淡水種，菌種培養可用蒸餾水，生產培養可用消毒的自來水(或井水)配制。如果培養的光合細菌是海水種，則用天然海水配制培養基，注意在海水中加入磷元素時，不能用磷酸氫二鉀，應用磷酸二氫鉀，不然會產生大量沉淀。2.滅菌和消毒菌種培養用的培養基應連同培養容器用高壓蒸氣滅菌鍋滅菌。小型生產性培養可把配好的培養液用普通鋁鍋或大型三角燒瓶煮沸消毒。大型生產性培養則把經沉淀砂濾后的水用漂白粉(或漂白液)消毒后使用。3.培養基配制根據所培養種類的營養需要選擇合適的培養基配方。按培養基配方把所需物質稱量，逐一溶解，混合，配成培養基。也可先配成母液，使用時按比例加入一定的量即可。(三)接種培養基配好后，應立即進行接種。光合細菌生產性培養的按種量比較高，一般為20%~50%，即菌種母液量和新配培養液雖之比為1∶4~1∶1，不應低于20%，尤其是微氣培養，接種量更應高些，否則光合細菌在培養液中很難占＊＊優勢，影響培養的＊終產量和質量。(四)培養管理光合細菌的培養過程中，管理工作包括日常管理操作和測試，生長情況的觀察、檢查以及出現問題的分析處理等三個方面。

一、ELISA板子劃板現象：在ELISA實驗中，經常會遇到板子劃板的問題，這主要表現在包被酶標板的聚苯乙烯（PS）底板上出現彎曲或不規則劃痕。原因：1. 酶標板在運輸過程中受到劇烈震動。2. 酶標板疊放或擺放不平整。3. 包被不均勻。解決方案：1. 在運輸過程中盡量減少震動，＊好使用防震包裝。2. 酶標板應平整疊放，避免過度彎曲。3. 保證包被溶液的均勻性，確保每孔的包被量一致。二、ELISA實驗中洗滌不徹底現象：在ELISA實驗中，洗滌不徹底是一個常見問題，表現為在洗滌后仍能看到板孔中有殘留的液體或顆粒物。原因：1. 洗滌液量不足或濃度不夠。2. 洗滌次數不夠或洗滌時間不足。3. 甩板力度不夠或甩板方式不當。解決方案：1. 確保洗滌液量充足，并根據需要調整洗滌液濃度。2. 增加洗滌次數或延長洗滌時間，確保每個孔都充分洗滌。3. 甩板時加大力度，確保液體充分甩出。同時，注意甩板方式，避免液體濺出。三、ELISA實驗中酶標板吸光度不穩定現象：在ELISA實驗中，有時會發現酶標板的吸光度不穩定，表現為在波長相同的情況下，吸光度值波動較大。原因：1. 酶標板質量不佳或保存不當。2. 實驗操作不規范或試劑不純。3. 溫度、pH等實驗條件不穩定。解決方案：1. 購買優質酶標板并按照說明書正確保存。2. 規范實驗操作，使用高質量的試劑和設備。3. 確保實驗條件穩定，如溫度、pH等參數在允許范圍內波動較小。

    酶聯免疫系統是用在大鼠elisa試劑盒上的，不過在技術還是缺乏標準化的，因此，我國有的部分就用的是標準血清，大家在收集血清標本的時候得都當心，而且放冰箱保持的時間不易過久的。在酶聯免疫測定尤其是直接大鼠elisa試劑盒中，試劑的特異性取決于。標本凝聚不全時，血清中會殘留部分纖維蛋白原，也易形成假陽性。檢修標本中含有酶符號物的攪擾物，內源性攪擾物類風濕因子（RF）、黃疸等，類風濕因子是可作用于多種動物以及人IgGFc段的自身抗體，大都為IgM類，能充任抗原成分與固相及酶標抗體反響，然后出現非特異性顯色。    大鼠elisa試劑盒如在冰箱中保存過久，其間的IgG可發作聚合，在直接法ELISA試劑盒中可使本底加深。但因為受方法學及技能條件的約束，在酶聯吸附測定中有時不可避免的會泛起一定的非特異性，但我們能夠經過以上措施把非特異性顯色降至zui低限底，然后前進檢測的特異性，并得到更正確、可靠的試驗成果。    一。大鼠elisa試劑盒的試劑，超卓的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測效果準確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的構成不同而有所差異，國內醫學查驗一般均用板式點。本文將敘說大鼠elisa試劑盒各個操作進程的留心要害，珠式、管式及磁性球ELSIA，國外試劑均與特別儀器協作運用，嚴峻遵照規矩操作，必能得出準確的效果。    二。可用作大鼠elisa試劑盒的標本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標本以測定其間某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定（如血清、尿液），有些則需經預處理（如糞便和某些分泌物）。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均對等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只需待血清天然凝聚、縮短后即可取得。除特別狀況外，在醫學查驗中均以血清作為檢測標本。在ELISA中血漿和血清可對等運用。    三。 大鼠elisa試劑盒血清標本可按常規辦法搜集，應留心避免溶血，紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質，以HRP為符號的ELISA測定中，溶血標本可能會添加非特異性顯色。    四。血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP，也會發生假陽性反應。大鼠elisa試劑盒如在冰箱中保存過久，其間的可發生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。    五。一般說來，在5天內測定的血清標本可放置于4℃，逾越一周測定的需低溫冰存。凍住血清融解后，蛋白質部分濃縮，散布不均，應充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上劇烈振動。混濁或有沉積的血清標本應先離心或過濾，澄清后再檢測。重復凍融會使抗體效價下跌，所以測抗體的血清標本如需保存作屢次檢測，宜少數分裝冰存。保存血清自搜集時就應留心無菌操作，也可參與恰當防腐劑。