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    做實驗對于很多人來說并不陌生，甚至很多人的工作就是很實驗有關的。一般做實驗會用到很多的物品，所以人們在做實驗前一定要準備妥當，不要有所遺漏。抗體也是經常會使用到的，但是抗體也不是隨便選的。那么做實驗應該怎樣選擇抗體？    1.分析實驗應用的類型    一般抗體說明書都列出該抗體經試驗驗證過適用于何種分析類型，如：可以應用于WB IHC ICC ELASA分析等，如果抗體說明書沒有提及的應用類型，并不意味著該抗體不適用于此種分析應用類型，而僅是說明尚未經過此種分析試驗驗證，如果抗體不適用某些分析試驗，則會在抗體說明書上標注出來不適于某分析試驗。    2.樣本的物種    應選擇物種相同或有交叉反應的抗體，抗體可能與不同物種的同種靶蛋白有交叉反應，因其氨基酸序列同源性較高，如果樣本的種類未列入抗體說明書上的交叉反應種屬表中，并不意味著該抗體不適用于檢測該物種的蛋白，而只是表示該物種尚未用此抗體檢測驗證過，應通過序列比對的方法來預測交叉反應，可應用Expasy 和 NCBI BLAST來進行不同物種蛋白同源性比對。    3.樣本蛋白的結構性質    了解樣本蛋白的結構性質有助于選擇zui合適的抗體，至少兩方面因素需要考慮    1）。待測樣本蛋白的結構域：抗體是由各種不同免疫原免疫宿主而制備得來，其中的免疫原包括：全長蛋白、蛋白片斷、多肽、全有機體（如：細菌）或細胞，抗體說明書一般都有免疫原的描述，如果打算檢測的是蛋白片斷或一種特殊的同型物或蛋白全長的某一區域，則必須選擇用含此片段域的免疫原制備出的抗體。如果打算用FACS流式檢測活細胞的表面蛋白，則需要選擇含該表面蛋白的胞外域來免疫制備的抗體。    2）。樣本的提取或處理過程：某些抗體要求樣本經過某些特殊處理，例如：許多抗體只識別還原和變性的、表位已暴露不受二級四級結構阻礙的蛋白樣本，另一方面，某些抗體僅識別天然折疊狀態的蛋白。當選擇免疫組化的抗體時，應注意某些抗體只識別未固定的冷凍的組織，而另一些抗體則適用于無需抗原修復解交聯步聚的甲醛固定石蠟包埋的組織，這些都會在抗體說明書上應用部分標示出來    4.一抗宿主物種的選擇    一般說來，在使用偶聯二抗結合無偶聯物的一抗時，一抗宿主動物的物種選擇較為重要，對于免疫組化而言，盡可能選擇與樣本不同種系物種的一抗，從而避免二抗與樣本內源性免疫球蛋白產生交叉反應，例如：檢測小鼠樣本蛋白，則不應選擇小鼠或大鼠源的一抗，選兔源的一抗，則二抗則可選擇偶聯了檢測分子（酶、熒光素、生物素等）的抗兔IgG。如果選擇有偶聯物的一抗則不適用上述情況，除免疫組化外的其它對不含內源性免疫球蛋白樣本的檢測方法，則抗體宿主物種的影響不大，如對不含IgG的細胞裂解物樣本的western blotting檢測，盡管如此，含有血清的組織裂解物和組織培養上清中含有免疫球蛋白，還原變性樣本中含IgG，在western blot檢測中則結合出現IgG分子50 and 25 kDa的重鏈和輕鏈條帶。    5.二抗的選擇    二抗應選用與使用的一抗相同的物種來源，例如：如果你的一抗是小鼠的單克隆抗體，二抗則選抗小鼠的二抗anti-mouse secondary。建議檢查二抗說明書確保該抗體適用于你的檢測應用， 二抗一般連接熒光素FITC或發光團。    6.雙重染色抗體的選擇    用未偶聯一抗進行細胞培養物或組織切片的雙重免疫染色要求一抗來源于不同物種并且二抗分別識別其中之一，二抗說明書應描述其與其它物種來源的免疫球蛋有否有交叉吸附。    7.熒光和化學發光標記    連接于二抗的標記物是為了檢測抗體的結合，選擇標記物依賴于幾個參數：    檢測方法：    熒光或著色沉淀，熒光標記物用特殊波長的光激發時發射出可見光。

    在很多實驗中都是需要使用到ELISA試劑盒，而且現在也是有著種類。一般ELISA試劑盒都有各種動物類型，大鼠ELISA試劑盒就是其中的一種，不過使用還是很頻繁的。不過使用大鼠ELISA試劑盒也是有很多的注意事項，這樣才不會對實驗數據造成影響，這一點大家一定要注意。那么大鼠ELISA試劑盒在使用之時還需要注意哪些問題？    1. elisa試劑盒應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。    2. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。    3. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。elisa試劑盒不同批號的試劑不要混用。保質前使用。    4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物a、b液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。    5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。    6. 洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。    7. 底物a應揮發，避免長時間打開蓋子。底物b對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取od值。    8. 加入elisa試劑盒的順序應一致，elisa試劑盒以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。    9. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

    現在做科研實驗是很常見的事情，很多人都是通過實驗得到自己想要的數據。而血清在實驗中也是經常使用到的材料，動物血清來源廣，也便宜，自然很受歡迎。不過人們在使用時血清的時候一定不要出錯，不然輕則影響實驗數據，重則毀掉實驗。下面這些操作大家一定要注意：    1.解凍血清不隨時搖晃均勻，使溫度及成分均一。    2.在沒有特別的要求下，還堅持要做熱滅活。    3.直接由-20℃直接至37℃解凍，溫度改變太大。    4.將血清置于37℃太久，血清變得渾濁，許多較不穩定的成份因此受到破壞。    注：在使用血清產品時，一定要從各個角度去考慮，不能大意。我公司技術專員建議您：血清應保存在-5℃至-20℃，若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內，再放回冷凍。從冷凍箱中取出后，先置于2-8℃冰箱中使之溶解，然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是，溶解過程中必須規則地搖晃均勻。

    想要對事物有更深的了解就是要不斷的做實驗，這樣才會得到自己想要的數據。所以很多人都會做ELISA試劑盒代測實驗，這個實驗相對簡單，適合很多人。不過ELISA試劑盒代測實驗也是有很多的種類，大鼠ELISA試劑盒代測實驗就是其中一種，不過做大鼠ELISA試劑盒代測實驗也是有很多的注意事項，不然實驗也是會失敗的，就讓大家一起來了解一下。    大鼠ELISA試劑盒代測實驗中注意事項    1. elisa試劑盒應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。    2. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。    3. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。elisa試劑盒不同批號的試劑不要混用。保質前使用。    4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物a、b液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。    5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。    6. 洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。    7. 底物a應揮發，避免長時間打開蓋子。底物b對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取od值。    8. 加入elisa試劑盒的順序應一致，elisa試劑盒以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。    9. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

　　ELISA試劑盒很多人都是有一定的了解，很多實驗都是需要使用到，幫助作用也是很大的。很多實驗使用ELISA試劑盒，都會讓效率大大提高，減少誤差。不過現在市面上的ELISA試劑盒也是很貴的，要是選錯了，是會造成很大的虧損。想要挑選合適的ELISA試劑盒也不是一件容易的事情。那么ELISA試劑盒要怎樣挑選呢？　　1. 查找待測樣本的蛋白濃度：可以通過 NCBI 的文獻，uniprot，pax-dab 上給出的蛋白表達量參考值來比較 ELISA 試劑盒中給出的樣本值與報道值是否一致；　　2. 試劑盒的應用種屬、檢測樣本的種類：除試劑盒特別說明外，一般不同種屬不能通用。常見待測樣本種類有：血清和血漿（不同抗凝劑），細胞上清，和細胞裂解液，試劑盒中不同樣本的稀釋液不混用；　　3. 試劑盒的檢測范圍：也就是標曲范圍，特別要注意待測樣本濃度是否落在標曲范圍內，對于濃度很高的樣本，可以先進行預實驗摸索到比較好的稀釋倍數后再大量測定樣本。　　4. 試劑盒中的稀釋線性及回收率：　　a. 稀釋線性一般指樣本稀釋線性，是將樣本梯度稀釋下來，看各稀釋梯度濃度是否成線性；參考樣本稀釋線性可以選擇樣本的zui佳稀釋倍數；　　b. 稀釋線性也有做加標稀釋線性的情況，加標稀釋線性是將標準品加入樣本中測定加入的標準品濃度測定是否準確；同樣也是確定待測樣本稀釋倍數的參考指標。一般線性和回收率的范圍在 80%-120% 比較合適；　　5. 試劑盒的其它指標：　　a. 靈敏度：試劑盒能夠檢測到的樣本低濃度的能力，如果待檢指標含量很低，需要選擇高靈敏度的 ELISA 試劑盒；　　b. 板間和板內的變異系數（CV%）: 反映板內和不同板之間是否均勻，CV% 一般小于 10% 比較好。　　6. 試劑盒的有效期：試劑盒的有效期一般是半年至一年，樣本準備時間需要考慮到試劑盒的有效期。　　7. 試劑盒的特異性：ELISA 試劑盒的特異性與試劑盒的關鍵組分，抗體對有關。若抗體對中之一為多抗，另一個必須為單抗，建議使用雙單抗。　　8. 重復性：科學實驗講求重復性，一般 ELISA 試劑盒，其板內和板間變異系數應該控制在 11% 和 15% 以內。　　9. 簡便性：試劑盒在保證高質量數據的情況下，實驗時間越短，操作越便利，越容易受到用戶歡迎。這也不妨作為選擇試劑盒的一個指標。　　10. 經濟性：進口分裝試劑盒因為省去不少物流和報關費用，與國外原裝進口試劑相比價格上有比較大的優惠，而且能提供比較靈活的包裝規格，特別是 48T 等小包裝，目前很多客戶因為對品牌的信任度問題，主要還是選擇國外原裝進口，但是國內進口分裝比較成熟的公司仍然是一個非常好的選擇。　　11. 美譽度：一個品牌不光要有知名度，更重要的是美譽度。通過行業調查公司以及網絡，相關宣傳資料等可以找到美譽度高的 ELISA 試劑盒供應商，這個反映的不僅是產品質量的問題，對供應商的售前售后服務也是一個非常嚴格的檢驗。目前國際上主要的 ELISA 供應商有 R&D 細胞因子方面的試劑盒，Bender 粘附分子方面的試劑盒，Cayman 花生四烯酸類產品的試劑盒，Merck(Linco) 內分泌研究方面的試劑盒, Invitrogen(Biosource) 磷酸化蛋白的 ELISA，動物細胞因子 ELISA 試劑盒等，國內主要的 ELISA 試劑盒供應商有武漢華聯科（Bio-Swamp），武漢基因美等。　　12. 文獻引用：產品的文獻引用特別是高質量的 SCI 文章的引用是很多用戶都關心的問題，這是業界對產品認可的一個非常重要指標，而且對相關用戶的科研有一定的借鑒作用。