產品名稱:兔蛋白激酶C-η(PKCη) ELISA 試劑盒品牌:篤瑪規格:96T/48T保存溫度:2-8℃保質期:6個月僅供參考,詳細操作請按照訂購試劑盒內的說明書操作! 試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品：36U/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存 ELISA(酶聯免疫吸附實驗)試劑盒檢測抗原或抗體的實驗。操作步驟一般包括以下幾個步驟操作步驟:試劑準備:根據試劑盒說明書將各種試劑準備好,包括抗體、酶標抗體、底物液、洗滌緩沖液等。樣本處理:將待檢測樣本進行適當處理,如稀釋、酶標記等。包被:將抗體稀釋至適當濃度,加入反應板中,4℃過夜。洗滌:將反應板洗滌 3 次,每次 3 分鐘,去除未結合的抗體。加樣:將待檢測樣本加入反應板中,孵育 1 小時。洗滌:再次洗滌反應板,去除未結合的樣本。加酶標抗體:加入酶標抗體,孵育 0.5-1 小時。洗滌:再次洗滌反應板。加底物液:加入底物液,孵育 10-30 分鐘。終止反應:加入終止液,停止反應。結果判定:通過測定 OD 值或直接觀察顏色變化,判斷樣本陽性或陰性。不同類型的 ELISA 試劑盒操作略有不同,具體操作應根據試劑盒說明書進行。同時,ELISA 實驗需要注意實驗條件的控制,如溫度、時間、洗滌力度等,以確保實驗結果的準確性和可重復性。問題解答:若實驗效果不好,請及時對顯色結果拍照,保留所用板條及未使用試劑,并妥善保存,然后聯系我公司技術支持為您解決問題。同時您也可以參考以下資料: 問題可能原因解決方案標準曲線差吸取及洗滌不充分充分的吸取及洗滌移液不檢查和校正移液器精密度低洗滌不充分按說明書要求充分洗滌和浸泡混勻不充分和吸取試劑不足充分混勻和吸取試劑重復利用吸頭、容器和覆膜使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的容器和覆膜加樣不檢查和校正移液器O.D值低每孔加的試劑量不校正移液器,加入試劑溫育時間不正確保證充足的溫育時間溫育溫度不正確試劑要平衡至室溫并保證準確的溫育溫度酶標記物或底物失效通過混合酶標記物和底物,顏色應迅速顯現來檢查沒有加入終止液按照說明書實驗操作步驟加入終止液超出讀數時間讀數在說明書推薦的讀數時間內讀數樣本值不正確的樣本儲存方式正確儲存樣本,使用新鮮樣本進行實驗不正確的樣本收集和處理方法采取正確的樣本收集和處理方法待測物質在樣本中含量低使用新鮮樣本,重復實驗其他elisa試劑盒代理品牌:
僅供研究使用 兔膽囊收縮素/腸促胰酶肽A受體(CCKAR) ELISA試劑盒實驗原理： 試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被兔膽囊收縮素/腸促胰酶肽A受體(CCKAR) 捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成＊終的黃色。顏色的深淺和樣品中的兔膽囊收縮素/腸促胰酶肽A受體(CCKAR) 呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份密封袋1個1個封板膜12孔×4條2片（96）2-8℃保存微孔酶標板1×4812孔×8條2-8℃保存標準品0.3mL*6管0.3mL*6管2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存注意：使用前請檢查試劑盒中試劑的標簽和數量與表格是否一致。試劑盒操作步驟： 實驗開始前，請提前配置好所有試劑，試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。1.加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。 為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。2.棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl（取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制），37℃,60分鐘。3.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液（同生物素標記抗體工作液） 100μl，37℃，60分鐘。5.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。6.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。7.依序每孔加終止溶液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。8.用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后15分鐘以內進行檢測。兔膽囊收縮素/腸促胰酶肽A受體(CCKAR) ELISA試劑盒標本的采集及保存：血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。細胞培養物上清或其它生物標本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 (注：標本溶血會影響**檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。)標本的稀釋原則：首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量，確定適當的稀釋倍數。只有稀釋至標準曲線的范圍內，檢測的結果才是準確的。稀釋的過程中，應做好詳細的記錄。計算濃度時，稀釋了“N”倍，標本的濃度應再乘以“N”。標準品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為300 pg/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內配制。 如配制150 pg/ml標準品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。生物素標記抗體的稀釋原則：臨用前以生物素標記抗體稀釋液稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標記抗體加990μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則：臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制實驗結果計算： 以標準物的濃度為橫坐標（對數坐標），OD值為縱坐標（普通坐標），在半對數坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。繪制標準曲線：在Excel工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應OD值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。注意事項：1.當混合蛋白溶液時應盡量輕緩，避免起泡。2.洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。3.一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數量多，建議使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。5.如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請乘以稀釋倍數。6.在配制標準品、檢測溶液工作液時，請以相應的稀釋液配制，不能混淆。7.底物請避光保存。8.不要用其它生產廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。試劑盒性能1．準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值，大于等于0.9900。2．靈敏度：＊低檢測濃度小于10 pg/ml。3．特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。4．重復性：批內與批見應分別小于9%和15%。
僅供研究使用 兔凝血因子Ⅹ(F10)ELISA試劑盒實驗原理： 試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被兔凝血因子Ⅹ(F10)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成＊終的黃色。顏色的深淺和樣品中的兔凝血因子Ⅹ(F10)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份密封袋1個1個封板膜12孔×4條2片（96）2-8℃保存微孔酶標板1×4812孔×8條2-8℃保存標準品0.3mL*6管0.3mL*6管2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存注意：使用前請檢查試劑盒中試劑的標簽和數量與表格是否一致。試劑盒操作步驟： 實驗開始前，請提前配置好所有試劑，試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。1.加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。 為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。2.棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl（取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制），37℃,60分鐘。3.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液（同生物素標記抗體工作液） 100μl，37℃，60分鐘。5.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。6.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。7.依序每孔加終止溶液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。8.用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后15分鐘以內進行檢測。兔凝血因子Ⅹ(F10)ELISA試劑盒標本的采集及保存：血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。細胞培養物上清或其它生物標本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 (注：標本溶血會影響**檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。)標本的稀釋原則：首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量，確定適當的稀釋倍數。只有稀釋至標準曲線的范圍內，檢測的結果才是準確的。稀釋的過程中，應做好詳細的記錄。計算濃度時，稀釋了“N”倍，標本的濃度應再乘以“N”。標準品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為300 pg/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內配制。 如配制150 pg/ml標準品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。生物素標記抗體的稀釋原則：臨用前以生物素標記抗體稀釋液稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標記抗體加990μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則：臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制實驗結果計算： 以標準物的濃度為橫坐標（對數坐標），OD值為縱坐標（普通坐標），在半對數坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。繪制標準曲線：在Excel工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應OD值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。注意事項：1.當混合蛋白溶液時應盡量輕緩，避免起泡。2.洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。3.一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數量多，建議使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。5.如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請乘以稀釋倍數。6.在配制標準品、檢測溶液工作液時，請以相應的稀釋液配制，不能混淆。7.底物請避光保存。8.不要用其它生產廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。試劑盒性能1．準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值，大于等于0.9900。2．靈敏度：＊低檢測濃度小于10 pg/ml。3．特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。4．重復性：批內與批見應分別小于9%和15%。
僅供研究使用 兔著絲粒蛋白E(CENPE)ELISA試劑盒實驗原理： 試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被兔著絲粒蛋白E(CENPE)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成＊終的黃色。顏色的深淺和樣品中的兔著絲粒蛋白E(CENPE)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份密封袋1個1個封板膜12孔×4條2片（96）2-8℃保存微孔酶標板1×4812孔×8條2-8℃保存標準品0.3mL*6管0.3mL*6管2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存注意：使用前請檢查試劑盒中試劑的標簽和數量與表格是否一致。試劑盒操作步驟： 實驗開始前，請提前配置好所有試劑，試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。1.加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。 為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。2.棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl（取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制），37℃,60分鐘。3.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液（同生物素標記抗體工作液） 100μl，37℃，60分鐘。5.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。6.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。7.依序每孔加終止溶液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。8.用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后15分鐘以內進行檢測。兔著絲粒蛋白E(CENPE)ELISA試劑盒標本的采集及保存：血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。細胞培養物上清或其它生物標本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 (注：標本溶血會影響**檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。)標本的稀釋原則：首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量，確定適當的稀釋倍數。只有稀釋至標準曲線的范圍內，檢測的結果才是準確的。稀釋的過程中，應做好詳細的記錄。計算濃度時，稀釋了“N”倍，標本的濃度應再乘以“N”。標準品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為300 pg/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內配制。 如配制150 pg/ml標準品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。生物素標記抗體的稀釋原則：臨用前以生物素標記抗體稀釋液稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標記抗體加990μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則：臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制實驗結果計算： 以標準物的濃度為橫坐標（對數坐標），OD值為縱坐標（普通坐標），在半對數坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。繪制標準曲線：在Excel工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應OD值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。注意事項：1.當混合蛋白溶液時應盡量輕緩，避免起泡。2.洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。3.一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數量多，建議使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。5.如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請乘以稀釋倍數。6.在配制標準品、檢測溶液工作液時，請以相應的稀釋液配制，不能混淆。7.底物請避光保存。8.不要用其它生產廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。試劑盒性能1．準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值，大于等于0.9900。2．靈敏度：＊低檢測濃度小于10 pg/ml。3．特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。4．重復性：批內與批見應分別小于9%和15%。
實驗原理 試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被兔間隙連接蛋白β1(GJβ1)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成＊終的黃色。顏色的深淺和樣品中的兔間隙連接蛋白β1(GJβ1)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。保存條件及有效期1.本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中兔間隙連接蛋白β1(GJβ1)的含量；2.試劑盒保存：2-8℃；3.有效期：6個月。兔間隙連接蛋白β1(GJβ1)ELISA試劑盒標本的采集及保存1.血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 3.細胞培養物上清或其它生物標本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 (注：標本溶血會影響**檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。) 兔間隙連接蛋白β1(GJβ1)ELISA試劑盒 標本的稀釋原則：首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量，確定適當的稀釋倍數。只有稀釋至標準曲線的范圍內，檢測的結果才是準確的。稀釋的過程中，應做好詳細的記錄。計算濃度時，稀釋了“N”倍，標本的濃度應再乘以“N”。 標準品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為300 pg/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內配制。 如配制150 pg/ml標準品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。 生物素標記抗體的稀釋原則：臨用前以生物素標記抗體稀釋液稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標記抗體加990μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。 辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則：臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。 兔間隙連接蛋白β1(GJβ1)ELISA試劑盒操作步驟 實驗開始前，請提前配置好所有試劑，試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。 1.加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。 為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。 2.棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl（取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制），37℃,60分鐘。 3.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液（同生物素標記抗體工作液） 100μl，37℃，60分鐘。5.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。6.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。7.依序每孔加終止溶液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。8.用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。兔間隙連接蛋白β1(GJβ1)ELISA試劑盒注意事項1.用戶在初次使用試劑盒時，應將各種試劑管離心數分鐘，以便試劑集中到管底。2.每次實驗留一孔作為空白調零孔，該孔不加任何試劑，只是**加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。 3.為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜。 4.未使用完的酶標板或者試劑，請于2-8℃保存。標準品、生物素標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、生物素標記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標記親和素工作液。 5.建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。 兔間隙連接蛋白β1(GJβ1)ELISA試劑盒洗板方法手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標板內的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內，浸泡1-2分鐘。根據需要，重復此過程數次。 自動洗板：如果有自動洗板機，應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。 計算 以標準物的濃度為橫坐標（對數坐標），OD值為縱坐標（普通坐標），在半對數坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。 注意事項1.當混合蛋白溶液時應盡量輕緩，避免起泡。2.洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。3.一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。5.如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請乘以稀釋倍數。6.在配制標準品、檢測溶液工作液時，請以相應的稀釋液配制，不能混淆。7.底物請避光保存。 8.不要用其它生產廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。 注意事項：收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4 ℃備用，如有特殊原因需要周期收集標本， 將標本及時分裝后放在-20 ℃或-70 ℃條件下保存。避免反復凍融。標本2 -8 ℃可保存48 小時，-20 ℃可保存1 個月。-70度可保存6 個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。計算：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。 兔間隙連接蛋白β1(GJβ1)ELISA試劑盒試劑盒性能1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.92以上。2.批內與批見應分別小于9%和15% 兔間隙連接蛋白β1(GJβ1)ELISA試劑盒
實驗原理 試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被兔胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成＊終的黃色。顏色的深淺和樣品中的兔胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。保存條件及有效期1.本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中兔胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)的含量；2.試劑盒保存：2-8℃；3.有效期：6個月。兔胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒標本的采集及保存1.血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 3.細胞培養物上清或其它生物標本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 (注：標本溶血會影響**檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。) 兔胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒 標本的稀釋原則：首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量，確定適當的稀釋倍數。只有稀釋至標準曲線的范圍內，檢測的結果才是準確的。稀釋的過程中，應做好詳細的記錄。計算濃度時，稀釋了“N”倍，標本的濃度應再乘以“N”。 標準品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為300 pg/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內配制。 如配制150 pg/ml標準品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。 生物素標記抗體的稀釋原則：臨用前以生物素標記抗體稀釋液稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標記抗體加990μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。 辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則：臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。 兔胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒操作步驟 實驗開始前，請提前配置好所有試劑，試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。 1.加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。 為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。 2.棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl（取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制），37℃,60分鐘。 3.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液（同生物素標記抗體工作液） 100μl，37℃，60分鐘。5.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。6.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。7.依序每孔加終止溶液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。8.用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。兔胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒注意事項1.用戶在初次使用試劑盒時，應將各種試劑管離心數分鐘，以便試劑集中到管底。2.每次實驗留一孔作為空白調零孔，該孔不加任何試劑，只是**加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。 3.為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜。 4.未使用完的酶標板或者試劑，請于2-8℃保存。標準品、生物素標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、生物素標記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標記親和素工作液。 5.建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。 兔胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒洗板方法手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標板內的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內，浸泡1-2分鐘。根據需要，重復此過程數次。 自動洗板：如果有自動洗板機，應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。 計算 以標準物的濃度為橫坐標（對數坐標），OD值為縱坐標（普通坐標），在半對數坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。 注意事項1.當混合蛋白溶液時應盡量輕緩，避免起泡。2.洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。3.一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。5.如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請乘以稀釋倍數。6.在配制標準品、檢測溶液工作液時，請以相應的稀釋液配制，不能混淆。7.底物請避光保存。 8.不要用其它生產廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。 注意事項：收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4 ℃備用，如有特殊原因需要周期收集標本， 將標本及時分裝后放在-20 ℃或-70 ℃條件下保存。避免反復凍融。標本2 -8 ℃可保存48 小時，-20 ℃可保存1 個月。-70度可保存6 個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。計算：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。 兔胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒試劑盒性能1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.92以上。2.批內與批見應分別小于9%和15% 兔胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒
實驗原理 試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被兔蛋白磷酸酶1調控亞基1A(PPP1R1A)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成＊終的黃色。顏色的深淺和樣品中的兔蛋白磷酸酶1調控亞基1A(PPP1R1A)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。保存條件及有效期1.本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中兔蛋白磷酸酶1調控亞基1A(PPP1R1A)的含量；2.試劑盒保存：2-8℃；3.有效期：6個月。兔蛋白磷酸酶1調控亞基1A(PPP1R1A)ELISA試劑盒標本的采集及保存1.血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 3.細胞培養物上清或其它生物標本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 (注：標本溶血會影響**檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。) 兔蛋白磷酸酶1調控亞基1A(PPP1R1A)ELISA試劑盒 標本的稀釋原則：首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量，確定適當的稀釋倍數。只有稀釋至標準曲線的范圍內，檢測的結果才是準確的。稀釋的過程中，應做好詳細的記錄。計算濃度時，稀釋了“N”倍，標本的濃度應再乘以“N”。 標準品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為300 pg/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內配制。 如配制150 pg/ml標準品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。 生物素標記抗體的稀釋原則：臨用前以生物素標記抗體稀釋液稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標記抗體加990μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。 辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則：臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。 兔蛋白磷酸酶1調控亞基1A(PPP1R1A)ELISA試劑盒操作步驟 實驗開始前，請提前配置好所有試劑，試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。 1.加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。 為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。 2.棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl（取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制），37℃,60分鐘。 3.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液（同生物素標記抗體工作液） 100μl，37℃，60分鐘。5.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。6.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。7.依序每孔加終止溶液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。8.用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。兔蛋白磷酸酶1調控亞基1A(PPP1R1A)ELISA試劑盒注意事項1.用戶在初次使用試劑盒時，應將各種試劑管離心數分鐘，以便試劑集中到管底。2.每次實驗留一孔作為空白調零孔，該孔不加任何試劑，只是**加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。 3.為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜。 4.未使用完的酶標板或者試劑，請于2-8℃保存。標準品、生物素標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、生物素標記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標記親和素工作液。 5.建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。 兔蛋白磷酸酶1調控亞基1A(PPP1R1A)ELISA試劑盒洗板方法手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標板內的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內，浸泡1-2分鐘。根據需要，重復此過程數次。 自動洗板：如果有自動洗板機，應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。 計算 以標準物的濃度為橫坐標（對數坐標），OD值為縱坐標（普通坐標），在半對數坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。 注意事項1.當混合蛋白溶液時應盡量輕緩，避免起泡。2.洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。3.一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。5.如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請乘以稀釋倍數。6.在配制標準品、檢測溶液工作液時，請以相應的稀釋液配制，不能混淆。7.底物請避光保存。 8.不要用其它生產廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。 注意事項：收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4 ℃備用，如有特殊原因需要周期收集標本， 將標本及時分裝后放在-20 ℃或-70 ℃條件下保存。避免反復凍融。標本2 -8 ℃可保存48 小時，-20 ℃可保存1 個月。-70度可保存6 個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。計算：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。 兔蛋白磷酸酶1調控亞基1A(PPP1R1A)ELISA試劑盒試劑盒性能1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.92以上。2.批內與批見應分別小于9%和15% 兔蛋白磷酸酶1調控亞基1A(PPP1R1A)ELISA試劑盒
實驗原理 試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被兔早老素2(PS2)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成＊終的黃色。顏色的深淺和樣品中的兔早老素2(PS2)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。保存條件及有效期1.本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中兔早老素2(PS2)的含量；2.試劑盒保存：2-8℃；3.有效期：6個月。兔早老素2(PS2)ELISA試劑盒標本的采集及保存1.血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 3.細胞培養物上清或其它生物標本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 (注：標本溶血會影響**檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。) 兔早老素2(PS2)ELISA試劑盒 標本的稀釋原則：首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量，確定適當的稀釋倍數。只有稀釋至標準曲線的范圍內，檢測的結果才是準確的。稀釋的過程中，應做好詳細的記錄。計算濃度時，稀釋了“N”倍，標本的濃度應再乘以“N”。 標準品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為300 pg/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內配制。 如配制150 pg/ml標準品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。 生物素標記抗體的稀釋原則：臨用前以生物素標記抗體稀釋液稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標記抗體加990μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。 辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則：臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。 兔早老素2(PS2)ELISA試劑盒操作步驟 實驗開始前，請提前配置好所有試劑，試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。 1.加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。 為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。 2.棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl（取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制），37℃,60分鐘。 3.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液（同生物素標記抗體工作液） 100μl，37℃，60分鐘。5.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。6.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。7.依序每孔加終止溶液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。8.用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。兔早老素2(PS2)ELISA試劑盒注意事項1.用戶在初次使用試劑盒時，應將各種試劑管離心數分鐘，以便試劑集中到管底。2.每次實驗留一孔作為空白調零孔，該孔不加任何試劑，只是**加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。 3.為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜。 4.未使用完的酶標板或者試劑，請于2-8℃保存。標準品、生物素標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、生物素標記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標記親和素工作液。 5.建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。 兔早老素2(PS2)ELISA試劑盒洗板方法手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標板內的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內，浸泡1-2分鐘。根據需要，重復此過程數次。 自動洗板：如果有自動洗板機，應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。 計算 以標準物的濃度為橫坐標（對數坐標），OD值為縱坐標（普通坐標），在半對數坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。 注意事項1.當混合蛋白溶液時應盡量輕緩，避免起泡。2.洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。3.一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。5.如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請乘以稀釋倍數。6.在配制標準品、檢測溶液工作液時，請以相應的稀釋液配制，不能混淆。7.底物請避光保存。 8.不要用其它生產廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。 注意事項：收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4 ℃備用，如有特殊原因需要周期收集標本， 將標本及時分裝后放在-20 ℃或-70 ℃條件下保存。避免反復凍融。標本2 -8 ℃可保存48 小時，-20 ℃可保存1 個月。-70度可保存6 個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。計算：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。 兔早老素2(PS2)ELISA試劑盒試劑盒性能1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.92以上。2.批內與批見應分別小于9%和15% 兔早老素2(PS2)ELISA試劑盒
實驗原理 試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被兔抑制蛋白β1(ARRβ1)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成＊終的黃色。顏色的深淺和樣品中的兔抑制蛋白β1(ARRβ1)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。保存條件及有效期1.本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中兔抑制蛋白β1(ARRβ1)的含量；2.試劑盒保存：2-8℃；3.有效期：6個月。兔抑制蛋白β1(ARRβ1)ELISA試劑盒標本的采集及保存1.血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 3.細胞培養物上清或其它生物標本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 (注：標本溶血會影響**檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。) 兔抑制蛋白β1(ARRβ1)ELISA試劑盒 標本的稀釋原則：首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量，確定適當的稀釋倍數。只有稀釋至標準曲線的范圍內，檢測的結果才是準確的。稀釋的過程中，應做好詳細的記錄。計算濃度時，稀釋了“N”倍，標本的濃度應再乘以“N”。 標準品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為300 pg/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內配制。 如配制150 pg/ml標準品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。 生物素標記抗體的稀釋原則：臨用前以生物素標記抗體稀釋液稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標記抗體加990μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。 辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則：臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。 兔抑制蛋白β1(ARRβ1)ELISA試劑盒操作步驟 實驗開始前，請提前配置好所有試劑，試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。 1.加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。 為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。 2.棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl（取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制），37℃,60分鐘。 3.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液（同生物素標記抗體工作液） 100μl，37℃，60分鐘。5.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。6.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。7.依序每孔加終止溶液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。8.用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。兔抑制蛋白β1(ARRβ1)ELISA試劑盒注意事項1.用戶在初次使用試劑盒時，應將各種試劑管離心數分鐘，以便試劑集中到管底。2.每次實驗留一孔作為空白調零孔，該孔不加任何試劑，只是**加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。 3.為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜。 4.未使用完的酶標板或者試劑，請于2-8℃保存。標準品、生物素標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、生物素標記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標記親和素工作液。 5.建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。 兔抑制蛋白β1(ARRβ1)ELISA試劑盒洗板方法手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標板內的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內，浸泡1-2分鐘。根據需要，重復此過程數次。 自動洗板：如果有自動洗板機，應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。 計算 以標準物的濃度為橫坐標（對數坐標），OD值為縱坐標（普通坐標），在半對數坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。 注意事項1.當混合蛋白溶液時應盡量輕緩，避免起泡。2.洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。3.一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。5.如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請乘以稀釋倍數。6.在配制標準品、檢測溶液工作液時，請以相應的稀釋液配制，不能混淆。7.底物請避光保存。 8.不要用其它生產廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。 注意事項：收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4 ℃備用，如有特殊原因需要周期收集標本， 將標本及時分裝后放在-20 ℃或-70 ℃條件下保存。避免反復凍融。標本2 -8 ℃可保存48 小時，-20 ℃可保存1 個月。-70度可保存6 個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。計算：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。 兔抑制蛋白β1(ARRβ1)ELISA試劑盒試劑盒性能1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.92以上。2.批內與批見應分別小于9%和15% 兔抑制蛋白β1(ARRβ1)ELISA試劑盒
實驗原理 試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被兔天青殺素1(AZU1)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成＊終的黃色。顏色的深淺和樣品中的兔天青殺素1(AZU1)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。保存條件及有效期1.本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中兔天青殺素1(AZU1)的含量；2.試劑盒保存：2-8℃；3.有效期：6個月。兔天青殺素1(AZU1)ELISA試劑盒標本的采集及保存1.血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 3.細胞培養物上清或其它生物標本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 (注：標本溶血會影響**檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。) 兔天青殺素1(AZU1)ELISA試劑盒 標本的稀釋原則：首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量，確定適當的稀釋倍數。只有稀釋至標準曲線的范圍內，檢測的結果才是準確的。稀釋的過程中，應做好詳細的記錄。計算濃度時，稀釋了“N”倍，標本的濃度應再乘以“N”。 標準品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為300 pg/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內配制。 如配制150 pg/ml標準品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。 生物素標記抗體的稀釋原則：臨用前以生物素標記抗體稀釋液稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標記抗體加990μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。 辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則：臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。 兔天青殺素1(AZU1)ELISA試劑盒操作步驟 實驗開始前，請提前配置好所有試劑，試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。 1.加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。 為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。 2.棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl（取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制），37℃,60分鐘。 3.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液（同生物素標記抗體工作液） 100μl，37℃，60分鐘。5.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。6.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。7.依序每孔加終止溶液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。8.用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。兔天青殺素1(AZU1)ELISA試劑盒注意事項1.用戶在初次使用試劑盒時，應將各種試劑管離心數分鐘，以便試劑集中到管底。2.每次實驗留一孔作為空白調零孔，該孔不加任何試劑，只是**加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。 3.為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜。 4.未使用完的酶標板或者試劑，請于2-8℃保存。標準品、生物素標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、生物素標記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標記親和素工作液。 5.建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。 兔天青殺素1(AZU1)ELISA試劑盒洗板方法手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標板內的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內，浸泡1-2分鐘。根據需要，重復此過程數次。 自動洗板：如果有自動洗板機，應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。 計算 以標準物的濃度為橫坐標（對數坐標），OD值為縱坐標（普通坐標），在半對數坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。 注意事項1.當混合蛋白溶液時應盡量輕緩，避免起泡。2.洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。3.一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。5.如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請乘以稀釋倍數。6.在配制標準品、檢測溶液工作液時，請以相應的稀釋液配制，不能混淆。7.底物請避光保存。 8.不要用其它生產廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。 注意事項：收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4 ℃備用，如有特殊原因需要周期收集標本， 將標本及時分裝后放在-20 ℃或-70 ℃條件下保存。避免反復凍融。標本2 -8 ℃可保存48 小時，-20 ℃可保存1 個月。-70度可保存6 個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。計算：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。 兔天青殺素1(AZU1)ELISA試劑盒試劑盒性能1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.92以上。2.批內與批見應分別小于9%和15% 兔天青殺素1(AZU1)ELISA試劑盒
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